雌激素受体（ER）包括 ERα 和 ERβ，通过同源或异源二聚体形成调控细胞生长与分化，但精确检测其二聚化仍具挑战。本研究开发并优化了基于荧光共振能量转移（FRET）的基因编码生物传感器，用于在活细胞中实时监测 ER 动态。通过结构分析、连接肽比较和最优荧光蛋白对筛选，作者构建了三种可检测细胞核内 ERαα、ERαβ 和 ERββ ...
雌激素调控转录的起始步骤是配体与雌激素受体（ERα和ERβ）结合。食物和环境中的植物化学物质可与内源性激素竞争，改变生理反应。本研究利用工程化生物传感器 ERα 和 ERβ PRL-array 细胞系，对224种黄酮化合物进行筛选，以表征其在雌激素信号通路多个步骤中的活性。结果显示，83种和96种黄酮分别可激活 ERα 或 ERβ；...
本文开发并表征了一种基于勺子形波导与雌激素受体（ERα）的表面等离子共振（SPR）生物传感器，用于实际水样中雌二醇的检测和定量。SPR平台的制备只需一步金属沉积，即在具有内置测量池的聚苯乙烯勺子形波导表面沉积金属层。通过在碗区敏感表面功能化特异性雌激素受体ERα，使其能够结合雌二醇，从而构建生物传感器。第一阶段在磷酸盐缓冲液中进行测...
微塑料因广泛存在及其对人体的潜在危害而受到关注，评估微塑料与健康细胞的生物物理相互作用已成为研究重点。本研究聚焦于利用表面等离子共振（SPR）探索微塑料的运动模式并发展低浓度检测方法。首先通过研磨和过滤制备平均粒径约20 μm的微塑料，并探究其在SPR微流控中的运动方式；随后利用SPR分析其特性。色谱分析表明，微塑料的表面电荷主导洗...
雌激素类化合物是环境中低浓度即可产生生物活性的污染物，其毒性主要通过雌激素受体（ER）介导。已有检测方法利用 ER 与短共识 DNA 序列——雌激素反应元件（ERE）之间的特异性相互作用进行识别。表面等离子共振（SPR）技术可在无标记条件下实时监测生物分子相互作用，并将识别事件转换为可量化的光学信号。本研究以 ER/ERE 相互作用...
雌激素受体（ER）在细胞信号通路中发挥重要作用，参与调节和维持生命基本活动，其异常表达与肿瘤发生密切相关。本文提出一种基于形成带3′平端DNA Y结的电化学方法检测ER。该DNA Y结的一条臂可结合ER；当ER结合到固定于电极表面的Y结时，可保护Y结免受Exo III催化消化。Y结还含有富含G四链体的双链区，加入血红素后产生电化学信...
建立能够全面表征潜在雌激素活性化学物质的生物传感器仍具挑战性。本文报道了一种基于雌激素受体（ER）的倏逝波荧光生物传感器，采用三重功能小分子–蛋白偶联物作为信号探针，用于水样中雌激素活性的测定。该探针由Cy5.5标记的链霉亲和素（STV）部分和17β-雌二醇（E2）部分组成，同时承担信号转换、信号识别和信号报告功能。当外源雌激素与偶...
基于报告基因技术的细胞检测在生物传感中应用广泛，可提供目标分析物的生物利用度和细胞毒性信息，但基因转录与翻译导致检测时间较长是其主要缺点。本文报道了两种稳定表达人雌激素受体α和β的酵母生物传感器，并采用NanoLuc作为报告蛋白，以升级广泛使用的酵母雌激素筛选（YES）检测。同时，作者开发了基于嵌合绿色发光荧光素酶PLG2的活力对照...
本文报道了一种在酿酒酵母中优化的非转录荧光细胞检测法，用于测定 D-seco 修饰甾体衍生物对雌激素受体 α、雌激素受体 β 或雄激素受体配体结合域的相对亲和力。将类固醇受体配体结合域与黄色荧光蛋白在酵母中融合表达；加入已知类固醇配体后，受体二聚化引起荧光共振能量转移，使荧光强度增加，从而可按剂量和时间依赖方式估计受体结合亲和力。利...
内分泌干扰物（EDCs）可干扰哺乳动物内分泌、免疫和神经系统，低浓度即可致病，因此需要快速灵敏的检测方法。本文提出一种无标记表面等离子共振（SPR）生物传感器方法，利用工程化雌激素受体α（ERα）配体结合域作为生物识别元件，检测17β-雌二醇（E2）、炔雌醇（EE2）、4-壬基酚（4-NP）和他莫昔芬等EDCs。配体结合诱导ERα构...
激素诱导癌症和生殖系统疾病增加，使外源雌激素筛查技术需求上升。本文报道了一种基于雌激素受体（ER）的可重复使用光纤生物传感器，用于环境雌激素化合物的简便筛选。该生物测定基于外源雌激素与17β-雌二醇（E2）竞争结合重组人雌激素受体α（hERα）蛋白，使E2游离并结合荧光标记抗E2单克隆抗体；未结合的抗体随后结合光纤表面固定的E2–蛋...
雌激素受体（ER）能够结合环境中广泛存在的大量有机污染物，即内分泌干扰物（EDCs）。其宽泛的选择性使其成为检测 EDCs 的理想生物识别元件。本文阐述了以 ER 为基础设计生物传感器和检测方法的整体策略与原理，并讨论使用天然 ER 或理性修饰 ER 分子的机会。文章指出，ER 的配体结合域（LBD）足以识别 EDCs，可通过重组表...
本文通过理性修饰雌激素受体（ER）蛋白配体结合域（LBD）的氨基酸组成，调控其配体结合特性。作者将已知雌激素受体-配体复合物的序列比对、结构分析与计算模拟相结合，预测了若干具有改变结合特性的 ER 突变体。随后通过定点突变制备单点突变重组蛋白，并采用竞争结合实验验证其结合特性。结果表明，部分突变体对某些内分泌干扰化学物（EDCs）的...
多溴联苯醚（PBDEs）可影响雌激素受体（ER）信号通路，羟基化PBDE（OH-PBDE）直接结合ER是可能机制之一。本研究用表面等离子共振（SPR）生物传感器定量测定22种不同溴代程度OH-PBDE与ER的结合亲和力。7种OH-PBDE可直接结合ER，KD为1.46×10−7 M至7.90×10−6 M，亲和力顺序为6-OH-BD...
植物雌激素因其雌激素特征及在女性健康中的生物学作用而成为重要研究主题。天然产物化学领域正开展大量研究以发现新型植物雌激素。其主要类别包括黄酮类、异黄酮类、木脂素、芪类及多种存在于可食用和/或药用植物中的化学基团，多属于豆科。与其他生物活性物一样，新结构及更强效植物来源植物雌激素的检测通常遵循天然产物发现的一般流程。基于传统医学知识和...
环境雌激素是一类可干扰体内激素信号的内分泌干扰物，与人和野生动物生殖异常、疾病风险增加相关。现有雌激素检测系统多聚焦特定机制或生殖终点，难以全面评估其对多种组织系统的潜在健康影响。本研究旨在开发并应用一种高灵敏度转基因斑马鱼生物传感器模型，实时评估环境雌激素在完整生物体中的信号效应。作者构建了含三个串联雌激素响应元件（ERE）诱导启...
雌激素类化合物是一类重要的激素物质，可来源于药物、人和动物排泄物、化学工业及微生物代谢，并作为环境污染物存在。本文报道了一种基于荧光蛋白片段互补的分子生物传感器，用于监测此类化合物。作者将单体黄色荧光蛋白 mVenus 分裂为 N 端片段 Vn(1–154) 和 C 端片段 Vc(155–239)，并将其分别融合在雌激素受体 α (...
本文报道一种用于潜在雌激素化合物预筛的新型表面等离子共振（SPR）生物传感器，通过构建雌激素受体（ER）特异性 DNA 芯片实现。将携带雌激素反应元件（ERE）的 DNA 单链共价固定于金表面经活化的 16-巯基-1-十六烷酸（MHA）与 11-巯基-1-十一烷醇（MUO）自组装单分子层上，使传感器能够特异、快速、无标记地检测雌激素...
本文研究雌激素受体 hERα 在硅烷化 SiO2 表面的可控固定，用于生物传感器应用。作者将重组人雌激素受体 hERα 与量子点染料 QD655 偶联，制备 hERα-QD655（Rcpt-qd655）生物偶联物，并采用 QD 与受体摩尔比 10–15 的溶液以获得最佳固定。利用 405 nm 蓝激光进行光致发光（PL）光谱，监测该...
为深入理解雌激素受体（ER）在基因表达调控中的作用，必须表征雌激素受体与雌激素反应元件（ERE）之间的相互作用。本文报道了一种高灵敏、可重复使用的硅纳米线（SiNW）生物传感器，用于研究人 ERα 和 ERβ 亚型蛋白与双链 ERE 的相互作用。ER 蛋白通过硅烷化学共价固定于 n 型 SiNW 表面，随后将野生型、突变型和乱序型 ...