Interplay of Affinity and Surface Tethering in Protein Recognition.
表面固定的配体–受体复合物是生物信号转导和细胞黏附的关键组分，也在单分子检测与生物技术中日益重要。本研究利用表面固定化传感方法，实时测量多种表面固定肽配体与其自由受体之间的结合动力学。作者以WD40重复蛋白5（WDR5）为受体，考察五种14残基SET1Win肽配体通过Win结合位点与WDR5及其突变体的相互作用。在生物层干涉（BLI...
Computational design of single-stranded DNA hairpin aptamers immobilized on a biosensor substrate.
适配体与附着表面的相互作用是适配体生物传感器设计与性能的核心。本文建立了一种计算建模方法，用于研究不同系统设计，包括适配体连接端、表面密度、取向和溶剂条件，并将其应用于固定在二氧化硅（SiO2）生物传感器基底上的抗MUC1单链DNA发夹适配体。MUC1是上皮癌早期检测的重要生物标志物，抗MUC1适配体为23个核苷酸的DNA发夹结构，...
Plasma functionalization procedure for antibody immobilization for SU-8 based sensor.
本文报道了一种用于SU-8层上抗原/抗体检测的抗体固定新方案。通过不同功率和时间的氧等离子体处理研究其对固定效率的影响，并用拉曼光谱和原子力显微镜表征SU-8在功能化及固定IgG前后的化学性质与表面形貌。氧等离子体处理后SU-8表面粗糙度增加，官能团强度发生变化。为验证方案有效性，用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗人IgG孵育后，...
Immobilized phage proteins for specific detection of staphylococci.
快速、特异性检测病原菌仍是感染性疾病诊断的重大挑战。噬菌体可表现出属级甚至种级特异性，并已被开发用于生物传感，但利用单个噬菌体蛋白进行检测的可能性尚未被充分探索。本研究利用固定于硅片上的特定噬菌体蛋白——内溶菌 LysK 和 F11 以及细菌素 lysostaphin——与葡萄球菌结合的能力。这些蛋白对 8 株临床分离的金黄色葡萄球...
Peptide nucleic acid (PNA)-DNA duplexes: comparison of hybridization affinity between vertically and horizontally tethered PNA probes.
本文比较了固体表面上垂直固定与新型水平固定肽核酸（PNA）探针的PNA–DNA双链杂交特性。水平固定的15-mer PNA探针在PNA骨架的三个γ位点引入连接分子，使探针主链与表面平行共价连接，从而适用于基于电场效应传感器的DNA杂交检测。作者采用放射性标记实验和实时表面等离子共振（SPR）生物传感器，分别评估新探针构型的表面密度、...
Antibody orientation on biosensor surfaces: a minireview.
检测元件在生物传感器的分析物识别中起关键作用，因此需要具有高分析物特异性和结合强度的识别元件。抗体（Ab）越来越多地用作生物传感器检测元件，但其在传感器表面的固定仍是一个关键挑战。本迷你综述重点介绍近期用于在表面上固定和表征抗体的方法。首先介绍用作检测元件的抗体种类，包括免疫球蛋白G（IgG）、Fab、单链可变片段（scFv）、单域...
Recombinant antibodies and their use in biosensors.
低成本、无创免疫分析可用于快速检测人体疾病。免疫分析的灵敏度和特异性高度依赖于高亲和力、抗原特异性抗体。抗体由生物体产生，其质量及是否适合用于免疫分析难以通过人为干预直接确定或控制。然而，利用基因工程和重组抗体技术，获得高质量抗体的过程已被缩短和简化。传统上依赖动物免疫可能需要数月甚至更长时间获得的抗体，如今可在数周内以细菌、酵母或...
Bioconjugation of the estrogen receptor hERα to a quantum dot dye for a controlled immobilization on a SiO2 surface.
本文研究雌激素受体 hERα 在硅烷化 SiO2 表面的可控固定，用于生物传感器应用。作者将重组人雌激素受体 hERα 与量子点染料 QD655 偶联，制备 hERα-QD655（Rcpt-qd655）生物偶联物，并采用 QD 与受体摩尔比 10–15 的溶液以获得最佳固定。利用 405 nm 蓝激光进行光致发光（PL）光谱，监测该...
Heterobifunctional modification of DNA for conjugation to solid surfaces.
许多生物传感器、DNA芯片和下一代DNA测序技术都需要对样品中产生的随机DNA序列进行通用末端修饰。化学修饰DNA的表面固定通常是构建合适传感平台的第一步。本文描述了一种简单、高效的方法，用于将任意双链DNA片段进行异双功能修饰，并在其两端引入选定的化学基团。该方法使用10–20 bp的短合成适配体，适配体带有所需末端功能基团，同时...
Locked nucleic acid based beacons for surface interaction studies and biosensor development.
DNA传感器和微阵列可通过分子信标（MB）实现核酸的快速、简单和实时检测，但MB用于固体表面生物传感器的潜力尚未充分发挥。主要原因是MB固定到固体表面后，发夹结构稳定性差，常导致信号增强较低。本文报道了一种新的MB设计，通过在信标结构中引入锁核酸（LNA）碱基，获得表面固定后仍具有稳健稳定性的LNA分子信标（LMB）。为评价LMB相...
Measurement of the kinetics of biomolecular interactions using the IAsys resonant mirror biosensor.
本文介绍 IAsys 共振镜生物传感器用于测量生物分子相互作用动力学的方法。生物传感器将传感表面上的结合事件通过换能器转换为电子信号，再由计算机处理得到结合量。IAsys 与 BIACORE 均使用光学检测，但 IAsys 采用共振镜换能器，而 BIACORE 采用表面等离子共振。实验中，先将配体固定到羧甲基化葡聚糖水凝胶或氨基硅烷...