肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae, MP）是儿童重要呼吸道病原体，常引起难治性和重症肺炎。快速、便携的诊断工具对临床管理至关重要。培养、ELISA和PCR等传统方法存在周期长、操作复杂或依赖实验室设备等不足。即时检测（POCT）技术因快速、便携、易用而成为MP诊断重点。本综述系统总结POCT平台进展，涵盖免疫学...
纸基快速检测因简单、低成本而广泛用于即时诊断，但其定量应用仍有限。本研究将核酸侧流层析检测（NALFA）与基于树莓派（Raspberry Pi）的自动图像采集系统集成，用于SARS-CoV-2病毒的定量检测，以提高相对于主观目视判读的准确性。该检测采用蓝色聚苯乙烯微球作为报告物，自动图像采集、图像处理和定量分析由定制Python软件...
马尔尼菲篮状菌（Talaromyces marneffei）是流行于东南亚和中国南部的致病性双相真菌，吸入孢子可致感染，播散性感染若未及时诊断和治疗可危及生命。本研究建立环介导等温扩增（LAMP）联合纳米颗粒侧流生物传感器（LFB）的可视化即时检测方法（T. marneffei-LAMP-LFB），用于检测该菌。研究基于rRNA基因...
CRISPR-Cas系统最初被鉴定为原核生物适应性免疫机制，现已迅速发展为分子诊断的强有力工具。凭借其精确的核酸靶向能力，CRISPR诊断可为多种靶标提供快速、灵敏且特异的检测方案。本综述深入阐述多种Cas蛋白（如Cas9、Cas12a、Cas13a）的基本原理及其不同作用机制（顺式切割与反式切割），并重点介绍其在传染病监测、癌症生...
本文报道了一种名为MebiQue-LFA的核酸整合侧流层析检测平台，首次将亚甲基蓝（MB）用作核酸侧流层析试纸条的新型比色信号示踪剂。该平台通过蓝色染料实现肉眼可视检测，并在同一试纸条上集成电化学换能，使低浓度样品在比色信号不足时仍可获得灵敏、可定量的电化学读数。以模型单链DNA为靶标，平台在缓冲液和50%稀释模拟血液中分别实现0....
PEAK1（假足富集非典型激酶1）表达或活性异常与细胞迁移、增殖、存活及多种疾病尤其是癌症发生发展密切相关，早期检测有助于指导靶向治疗。本研究将 Cas13a 的特异性 RNA 切割能力与电化学传感技术相结合，建立一种用于 PEAK1 早期诊断的新方法。Cas13a 在 crRNA 引导下具有顺式切割活性，可特异性识别并切割目标 R...
核酸检测技术对分子诊断至关重要。CRISPR/Cas12a 核酸检测的出现显著拓展了其应用范围，从感染性疾病病原微生物鉴定到疾病相关生物标志物检测。该系统利用 Cas12a 在识别靶 DNA 后产生的非特异性单链核酸切割活性，通过引入单链 DNA/RNA 荧光探针，使探针被非特异性切割后发生荧光变化，从而实现靶核酸检测。CRISPR...
本文综述了基于体外T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）反应的生物传感策略。T7 RNAP可特异性识别T7启动子，并在等温条件下从DNA模板连续转录RNA，从而为核酸与非核酸分析物检测提供信号放大。作者系统总结了将T7 RNAP与荧光适配体、电化学探针、比色体系及CRISPR/Cas系统相结合的方法：目标物与DNA模板或探针相互作用后...
本文设计并验证了一种改良酶片段互补检测法，作为稀水溶液中核酸检测的开启型生物传感器。该检测法具有靶序列激动特性，使用 NanoBiT 分裂荧光素酶片段，其 C 端经酶促酯化连接到 steramers（甾醇连接寡核苷酸）。果蝇 hedgehog 自加工结构域 DHhC 作为自切割酶，用于 NanoBiT-steramer 生物偶联。与...
本文综述了由周期性硅纳米柱阵列构成的全介质超表面在生物传感中的最新进展。超表面是人工设计的纳米结构功能表面，已发展出基于共振波长漂移和荧光检测两类生物传感器。全介质超表面具有光学磁模共振，可显著增强荧光检测能力，用于核酸、抗原、抗体等多种生物分子检测。文章比较了凝胶电泳、酶联免疫吸附试验、光学共振、拉曼散射、荧光和电化学等方法的适用...
全球新发传染病凸显快速病原诊断需求，拉雅亨尼帕病毒（LayV）作为新发人畜共患病毒缺乏即时检测工具。本研究基于 CRISPR-Cas12a 开发高灵敏 LayV 检测方法。将 Cas12a 与重组酶聚合酶扩增（RPA）联用，在室温 30 min 内实现 10 copies/mL 的 LayV RNA 超灵敏荧光检测；进一步构建辣根过...
传染病严重威胁人与动物健康，现有诊断方法常依赖昂贵设备、专业实验室，且存在耗时、灵敏度和特异性不足等问题，难以满足大规模现场检测需求。近年来，成簇规律间隔短回文重复（CRISPR）诊断平台凭借超灵敏核酸检测能力，推动了分子诊断领域变革。本文综述了不同 CRISPR/Cas 系统的类型、Cas 蛋白特性及核酸扩增策略，重点介绍 CRI...
食品源病原微生物对食品安全构成严重威胁，传统生化检测方法存在耗时长、灵敏度低、成本高和依赖专业设备等不足。近年来，CRISPR/Cas系统因具有高度灵活性、灵敏性和特异性，成为病原微生物检测的新兴工具。本文综述了具有横向切割活性的CRISPR/Cas系统在食品源病原菌检测中的研究进展，简要分类并讨论了Cas9、Cas12、Cas13...
在环境样品（如水体）中检测军团菌对公共卫生监测和暴发防控至关重要。传统培养法和聚合酶链反应虽有效，但存在耗时长、需专业人员及专用实验室设备等局限。生物传感技术因快速、灵敏、低成本和现场检测能力而成为有前景的替代方案。本研究以‘Legionella’ AND ‘biosensors’ NEAR ‘environmental sampl...
CRISPR/Cas系统在新型生物传感核酸检测中具有重要潜力。目前化脓性链球菌（Streptococcus pyogenes, S. pyogenes）临床诊断主要依赖血清学鉴定、培养和PCR，耗时长且需要复杂设备。本研究建立一种快速、简便、高灵敏的S. pyogenes检测与筛查方法，可作为现有临床检测的补充。样品处理10 min...
生物标志物（如DNA、RNA和蛋白质）的检测在医学诊断中具有重要作用。基于CRISPR的生物传感器利用CRISPR/Cas系统对目标进行生物识别，并采用生物传感器策略读出生物信号，无需专业操作。因此，基于CRISPR的生物传感器在具有高灵敏度和特异性地检测生物标志物方面展现出巨大潜力。然而，其信号读出仍依赖专用检测器，限制了其在医学...
石墨烯场效应晶体管（GFET）因在生物分子信号放大方面具有优异性能，被广泛用于生物传感，在临床诊断的高灵敏度和即时检测方面具有巨大潜力。然而，复杂制备步骤是限制 GFET 进一步研究和应用的主要瓶颈。本研究提出一种模块化制备技术，通过 3 个独立步骤构建微流控 GFET 生物传感器。通过引入低熔点金属电极和复杂流道，保持石墨烯结构完...
环介导等温扩增（LAMP）技术因快速、高灵敏而广泛用于感染性疾病检测，但传统LAMP信号方法主要反映双链DNA总量或环境变化，缺乏序列特异性，易受非特异扩增干扰。本研究将三链形成寡核苷酸（TFO）探针引入LAMP体系，以增强序列特异性，并用于B群链球菌（GBS）检测。TFO探针可识别LAMP扩增产物中设计的TFO靶向序列（TTS），...
准确快速检测核酸序列对疾病监测、临床治疗、基因分析和药物发现至关重要。本研究开发了一种“开启式”荧光生物传感器，用于简单高效检测核酸生物标志物。该体系以6-羧基荧光素标记的单链DNA（FAM-ssDNA）作为分子识别元件和荧光报告基团，并与聚多巴胺功能化树枝状纤维二氧化硅纳米颗粒（DFNS@DA）结合。DFNS@DA通过多元金属离子...
本文报道了CRISPR/Cas12a反式切割激活的一种新调控机制：与向导RNA部分匹配的小型环状DNA纳米结构（Cir-mediator）仅能极弱地激活Cas12a核糖核蛋白（RNP），而将其线性化后可恢复激活。基于此，作者建立了自催化Cas12a环状DNA扩增反应（AutoCAR）体系，使单个核酸靶标可激活多个RNP，大幅提高每个...