tau病以神经元或胶质细胞中错误折叠tau蛋白聚集为特征。本研究利用NanoBiT（NanoLuciferase Binary Technology）结构互补报告系统，对Spectrum Collection等化合物库筛选tau自相互作用抑制剂，并经剂量反应、细胞毒性和微管去稳定化评估。作者建立种子诱导tau相互作用生物传感器和无细...
从头设计小分子结合蛋白有望按需开发任意小分子传感器。本研究结合深度学习与基于物理的方法，生成具有多样且可设计口袋几何结构的 NTF2 样蛋白家族，并用于计算设计针对六种小分子靶标的结合蛋白。生物物理表征显示，所设计结合蛋白具有纳摩尔至低微摩尔结合亲和力，且设计精度达到原子水平。作者进一步利用皮质醇结合蛋白构建化学诱导二聚化（CID）...
本文设计并验证了一种改良酶片段互补检测法，作为稀水溶液中核酸检测的开启型生物传感器。该检测法具有靶序列激动特性，使用 NanoBiT 分裂荧光素酶片段，其 C 端经酶促酯化连接到 steramers（甾醇连接寡核苷酸）。果蝇 hedgehog 自加工结构域 DHhC 作为自切割酶，用于 NanoBiT-steramer 生物偶联。与...
药物发现领域的进展使生物传感器成为不可或缺的工具，其精确性、灵敏度和实时监测能力尤为突出。本综述首先概述癌症药物发现，强调生物传感器在推进癌症研究中的关键作用，随后重点讨论用于癌症药物发现的荧光与生物发光技术，包括FRET、TR-FRET、BRET、NanoBRET和NanoBiT。这些传感器推动了多项突破，例如通过NanoBiT筛...
Gasdermin D（GSDMD）是焦亡的关键执行蛋白，在心力衰竭、癌症等多种炎症相关疾病中发挥重要作用，是潜在治疗靶点。由于 GSDMD 缺乏酶活性，其功能研究长期依赖半定量 Western blot，难以在活细胞中实时定量其构象、表达水平和 caspase 介导切割。本研究基于 NanoBiT 技术构建新型 GSDMD 生物发...
呼吸道病毒如 SARS-CoV-2、甲型流感病毒（IAV）和呼吸道合胞病毒（RSV）构成重大公共卫生风险。现有快速诊断多检测单一抗原或核酸，其含量不一定与完整病毒颗粒数量相关。本文报道 GLOVID，一种模块化生物发光生物传感器平台，可在游离病毒蛋白背景中特异性检测完整病毒颗粒。该平台利用病毒颗粒表面多种蛋白的多价展示，模板化重组分...
实体瘤普遍能够逃避接触抑制增殖（CIP），即在细胞间接触发生时停止增殖的保护机制。Merlin 是一种 ERM 样蛋白，对 CIP 具有关键调控作用，并在多种癌症中频繁失活，因此是肿瘤生物学中重要的肿瘤抑制因子。尽管 Merlin 在癌症中的作用已被广泛研究，但由于其缺乏固有催化活性且频繁发生构象变化，一直是难以研究的蛋白。为应对这...
本文设计并验证了一种基于核酸杂交驱动蛋白片段互补的增益型生物传感器，用于检测核酸-核酸相互作用。该体系将NanoBiT发光酶的大片段LrgBiT和小片段SmBiT的C端通过酯键连接到甾醇修饰寡脱氧核苷酸（steramer）上，并利用果蝇hedgehog自加工结构域DHhC作为自切割催化元件完成生物偶联。当存在含有相邻互补序列的单链D...
在阿尔茨海默病中，tau 病理被认为以类似朊蛋白的方式沿相连神经元网络扩散。为此，通常位于胞质的 tau 蛋白必须先通过非经典途径分泌，再被相连神经元摄取。尽管健康 tau 与病理性 tau 的分泌均已被报道，但二者是否通过重叠或不同机制释放仍不清楚。本研究建立了一种高灵敏度的生物发光检测系统，用于评估原代小鼠海马神经元中假高磷酸化...
σ1受体（S1R）是一种配体调节的非阿片类细胞内受体，参与疼痛、心血管病、癌症、药物成瘾和神经退行性疾病等多种病理过程。由于缺乏简单、可靠的功能性测定方法，S1R配体的鉴定与分类及其药物开发面临挑战。本研究开发了一种基于NanoBiT技术的新型活细胞生物传感器，利用S1R与内质网驻留伴侣蛋白结合免疫球蛋白蛋白（BiP）形成异源二聚体...
新冠疫情仍是全球公共卫生威胁。SARS-CoV-2感染中，病毒刺突蛋白（Spike）与宿主血管紧张素转换酶2（ACE2）的结合是病毒入侵关键。本研究开发了可在细胞培养上清中检测Spike受体结合域（RBD）与ACE2相互作用的发光生物传感器SpACE-CCM。该传感器基于分裂NanoLuc双分子互补，将Spike RBD与ACE2胞...
现有蛋白检测多依赖高度功能化的抗体试剂，存在表达基础设施要求高、需化学修饰固定或偶联、且常需多种抗体等局限。本文设计了一种单组分、重组、化学发光生物传感器 S-BAT，可在大肠杆菌和酿酒酵母中表达。该传感器将计算设计的小型结合蛋白 LCB1 与 NanoBiT 分裂荧光素酶 SmBiT 和 LgBiT 串联融合；未结合抗原时分裂酶重...
免疫检测如酶联免疫吸附试验（ELISA）在即时检测中常受限于蛋白固定化、多步结合与洗涤。本文提出基于分裂荧光素酶的简单模块化“混合即读”酶互补实验与分析框架，用于溶液中分析物的敏感检测与定量。针对目标分析物非重叠表位的两个工程化蛋白结合子分别融合到无活性荧光素酶片段，形成生物传感器探针。通过酵母表面展示从Sso7d突变组合库分离靶向...
Fc工程化日益用于调节治疗性抗体与多种Fc受体的相互作用，以改善疗效和安全性。其中，免疫细胞表面的Fcγ受体（FcγRs）可介导抗体依赖性细胞毒作用（ADCC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），因此抗体发现过程中常需测定抗体Fc域与FcγR（Fc/FcγR）的结合亲和力。为支持高通量筛选，作者基于NanoBiT发光蛋白互补技术开...
钙离子是真核细胞中普遍存在的第二信使，与神经元活动、T细胞活化等过程密切相关。实时钙指示剂（如GCaMP）可提供毫秒级动态成像，而新型钙积分器可将短暂钙活动转化为稳定基因表达。本文报道LuCID，一种兼具实时指示与转录积分功能的双用途钙探针。LuCID的钙依赖型split luciferase组分利用NanoBiT系统，在furim...
本文综述了用于细胞内钙离子（Ca2+）流成像的生物发光基因编码钙指示剂（GECI）研究进展，并介绍一种新的基于强度型生物发光的钙传感器 CalBiT。与荧光 GECI 相比，生物发光 GECI 无需激发光，可避免组织自发荧光、光毒性、光漂白和光谱串扰，具有较高信噪比，适合活细胞及潜在深组织成像。现有 GECI 包括基于水母荧光素酶 ...
严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）正在全球快速传播并持续变异，亟需一种简单、灵敏且高通量的方法定量病毒—宿主相互作用，以快速评估变异株的感染能力并筛选或验证抗病毒药物。本研究开发了一种超灵敏生物发光生物传感器，通过定量SARS-CoV-2受体结合域（RBD）与宿主细胞受体血管紧张素转换酶2（ACE2）之间的相互作用...
Hippo信号网络依赖蛋白-蛋白相互作用（PPI）传递信号，调控器官大小、细胞增殖与分化、肿瘤发生等过程。当前研究旨在解析上游Hippo组分的复杂调控并寻找癌症治疗靶点，但亲和纯化质谱（AP-MS）等传统方法尚不足以实现这些目标。本综述介绍近期利用荧光素酶生物传感器研究Hippo通路的新方法。这些传感器可在体外使用纯化传感器蛋白，也...
随着新冠疫情持续，亟需快速诊断工具和靶向 SARS-CoV-2 的有效抗病毒药物。本研究开发了一种基于生物发光的新型生物传感器，用于探测病毒进入过程中的关键宿主-病毒相互作用：SARS-CoV-2 刺突蛋白（S）与受体血管紧张素转换酶 2（ACE2）的结合。该传感器源自 NanoLuc 二元技术（NanoBiT），由分裂为两个互补亚...
尽管SARS-CoV-2与SARS-CoV-1序列相似，但其毒力更强，给病原性研究带来独特挑战。病毒受体结合域（RBD）与宿主主要受体血管紧张素转换酶2（ACE2）的相互作用，已成为抗病毒药物和疫苗开发的关键靶点。本研究利用作者近期开发的NanoBiT技术生物传感器及假病毒感染实验，选择性鉴定并表征SARS-CoV-2 RBD和AC...