苯丙酮尿症（PKU）是一种以苯丙氨酸（PHE）水平升高为特征的罕见代谢病，需要终身饮食管理和定期监测。现有 PHE 监测方法如流动注射分析-串联质谱（FIA-MS/MS）依赖实验室，需送样并造成结果延迟，因此亟需即时检测（PoC）方案。我们开发了一种基于生物发光的 PHE 传感器，并整合 phenyx 智能手机应用，实现实时监测与数...
呼吸道病毒如 SARS-CoV-2、甲型流感病毒（IAV）和呼吸道合胞病毒（RSV）构成重大公共卫生风险。现有快速诊断多检测单一抗原或核酸，其含量不一定与完整病毒颗粒数量相关。本文报道 GLOVID，一种模块化生物发光生物传感器平台，可在游离病毒蛋白背景中特异性检测完整病毒颗粒。该平台利用病毒颗粒表面多种蛋白的多价展示，模板化重组分...
血清学抗体检测对传染病诊断与控制具有重要意义。非洲猪瘟是家猪和野猪最严重的传染病，近年来严重威胁全球养猪业。本文开发了一种基于分裂荧光素酶系统的快速、简便、灵敏免疫分析方法，用于检测非洲猪瘟病毒（ASFV）特异性IgG抗体。在该方法中，ASFV的p30蛋白与纳米荧光素酶NanoLuc的LgBiT和SmBiT亚基进行基因偶联，作为融合...
本文综述了用于细胞内钙离子（Ca2+）流成像的生物发光基因编码钙指示剂（GECI）研究进展，并介绍一种新的基于强度型生物发光的钙传感器 CalBiT。与荧光 GECI 相比，生物发光 GECI 无需激发光，可避免组织自发荧光、光毒性、光漂白和光谱串扰，具有较高信噪比，适合活细胞及潜在深组织成像。现有 GECI 包括基于水母荧光素酶 ...
细胞内离子强度通过调节蛋白质活性、聚集、相分离和细胞体积等过程，影响细胞存活与增殖，并可因离子通道活性或微环境渗透压改变而变化，因此需要实时监测工具。本文开发了一种基于 NanoLuc 荧光素酶的生物发光细胞内离子强度传感策略。重组纯化蛋白实验表明，NanoLuc 生物发光在宽范围缓冲液离子强度条件下具有离子强度依赖性；高离子强度下...
由生物分子和活细胞构成的生物传感器与全细胞生物传感器能够感知生物体系中的特定刺激，并将其转换为可测量信号。其中，基于荧光素酶的生物发光传感器在分子生物学和成像系统中应用广泛。本项目利用圆形排列策略设计并构建了一种用于检测和定量 Caspase-9 活性的荧光素酶生物传感器。光谱学结果表明，圆形排列导致该传感器结构发生改变。随后，研究...
维生素D受体（VDR）配体，如1α,25-二羟基维生素D3 [1α,25(OH)2D3]及其类似物，因在I型佝偻病、骨质疏松、银屑病、白血病和癌症等疾病治疗中的潜在临床应用而受到研究。此前，我们报道了一种基于分裂荧光素酶的生物传感器，可在短时间内检测VDR配体并评估其与VDR配体结合域（LBD）的亲和力。然而，若要检测血浆中1α,2...
本研究报道了一种基于分裂荧光素酶的新型生物发光传感器，用于在体内外评价维生素D受体（VDR）配体。此前构建的 LucN-LBD-LucC 传感器由萤火虫荧光素酶 N 端片段（LucN）、VDR 配体结合域（LBD）和 C 端片段（LucC）融合而成，VDR 配体结合后荧光素酶光强下降，虽可快速检测但灵敏度不足。为此，作者将参与 LB...
分裂荧光素酶技术广泛用于检测蛋白-蛋白相互作用及激素、维生素等生物活性小分子。作者此前在COS-7细胞中成功表达荧光素酶与维生素D受体（VDR）配体结合域（LBD）的嵌合蛋白LucC-LBD-LucN，命名为分裂荧光素酶维生素D生物传感器（SLDB），可在哺乳动物细胞中检测并区分VDR激动剂与拮抗剂。本研究建立了利用大肠杆菌表达SL...
活性维生素D通过维生素D受体（VDR）调控钙磷稳态、细胞分化和免疫相关基因表达。许多维生素D类似物已用于I型佝偻病、骨质疏松、肾性骨营养不良、银屑病、白血病和乳腺癌等治疗。作者构建了含拆分荧光素酶和VDR配体结合域（LBD）的两种融合蛋白：LucN-LBD-LucC和LucC-LBD-LucN。其中LucC-LBD-LucN（荧光素...