Fc工程化日益用于调节治疗性抗体与多种Fc受体的相互作用，以改善疗效和安全性。其中，免疫细胞表面的Fcγ受体（FcγRs）可介导抗体依赖性细胞毒作用（ADCC）和抗体依赖性细胞吞噬作用（ADCP），因此抗体发现过程中常需测定抗体Fc域与FcγR（Fc/FcγR）的结合亲和力。为支持高通量筛选，作者基于NanoBiT发光蛋白互补技术开...
免疫球蛋白G（IgG）的N-糖基化谱被认为是关键质量属性，因为它影响IgG与Fcγ受体（FcγR）的相互作用，进而影响抗体依赖性细胞免疫反应。本研究在表面等离子共振（SPR）生物传感器检测中，考察了FcγR捕获方法以及FcγR N-糖基化对多种曲妥珠单抗（trastuzumab, TZM）糖型相互作用动力学的影响。作者开发了基于卷曲...
蛋白化学生物素化及链霉亲和素或抗生物素捕获常作为将蛋白固定于生物传感器表面的可控替代方案。生物素化可能阻断感兴趣相互作用位点，降低表观活性；最小生物素化可减轻活性损失，但若标记参与结合的氨基酸仍可能阻断结合位点。本文以低亲和力 Fcγ 受体为模型，开展最小标记反应条件优化研究。该类蛋白在 IgG 结合活性位点含多个赖氨酸，适合研究最...
本文报道了四种生物素化 Fcγ 受体（FcγR）胞外域的生产及其在链霉亲和素生物传感器表面上的稳定捕获。受体生物素化采用哺乳动物细胞共转染策略：将编码 FcγR 胞外域（融合生物素受体肽 BAP）和 BirA 酶的质粒共同转染细胞，实现胞内定点生物素化，并与标准体外酶法生物素化在生物素化水平和产量方面进行比较。两种策略制备的生物素化...
本研究报道了通过哺乳动物细胞瞬时转染表达并纯化两种 Fcγ 受体胞外域 CD16a 和 CD64，用于开发单克隆抗体生产批次质量控制的定量检测方法。作者将带 C 端 His 标签的 CD16a 和 CD64 胞外域经 IMAC 和 SEC 纯化，以胺基偶联或抗 His 抗体定向捕获方式固定在 CM5 SPR 芯片表面，实时监测其与曲...
表面等离子共振（SPR）是体外评价 IgG 效应功能的关键技术，尤其用于研究抗体 Fc 段与 Fcγ 受体（FcγR）的结合。本文介绍一种基于 SPR 生物传感器的动力学检测方法：首先利用 NHS/EDC 活化 CM5 传感器芯片的羧甲基葡聚糖基质，将金黄色葡萄球菌 Protein A 化学偶联到芯片表面；随后将人 IgG1 抗体（...