Microvirin（MVN）是一种已知可与 HIV-1 包膜糖蛋白 gp120 发生单价相互作用的凝集素。此前报道的高分辨率结构已定义了 MVN 的甘露二糖结合腔，但结构本身并不能直接说明结合位点各残基对结合能的贡献。为阐明 MVN 与 HIV-1 Env 糖基化表位相互作用的本质，本研究通过定点突变评估 MVN 甘露二糖结合位点...
糖基化是蛋白质最常见的翻译后修饰，参与调控正常与病理状态下的多种生物学过程。异常糖基化与恶性转化密切相关，可形成与肿瘤发生、进展相关的特征性糖模式，并影响肿瘤增殖、侵袭、转移和治疗抵抗。癌细胞释放的小细胞外囊泡（sEVs）携带与其来源细胞相似的糖模式，因此有望成为癌症监测标志物。然而，现有技术难以追踪循环中肿瘤来源的痕量 sEVs，...
本研究采用从头算量子力学方法，系统考察单壁碳纳米管（SWCNTs）和碳纳米带（CNB）对 SARS-CoV-2 刺突糖蛋白 N-连接与 O-连接糖链的电子响应。研究选取锯齿、扶手椅和手性三组碳纳米管，分析碳纳米管手性对碳纳米材料与糖蛋白相互作用的影响。结果表明，金属性碳纳米管对糖链存在几乎无响应，而手性半导体碳纳米管在糖链存在时，其...
黑色素瘤因早期转移和频繁治疗抵抗而危及生命，目前尚无单一组织学、免疫组化或血清学标志物能精确预测患者侵袭行为，因此亟需可同时诊断与预后的定量方法。本文利用生物传感器技术研究特定分子相互作用，以凝集素刀豆蛋白A（Concanavalin A, Con A）识别细胞表面糖链，基于带耗散监测的石英晶体微天平（QCM-D）对商业和患者来源黑...
为提高生物制药过程的生产率、一致性和产品质量，开发用于在线或在线监测关键生物过程参数的新型传感器具有重要意义。作者此前开发了一种可用于一次性、在线和长期葡萄糖监测的葡萄糖生物传感器，并将其集成到自动化葡萄糖监测与补料系统中，即使在极低浓度下也能维持稳定葡萄糖水平。该研究将这一反馈式补料系统在低（<1 mM）和高（40 mM）葡萄糖水...
CD147参与多种生理过程，并在肿瘤转移中发挥重要作用，其糖基化状态决定多种生物学功能。目前几乎没有可用于活细胞中检测CD147糖基化的传感器，因此迫切需要开发选择性、连续性的细胞成像生物传感器。基因编码荧光共振能量转移（FRET）传感器为分析提供了新途径。作者设计并构建了新型基因编码FRET蛋白，通过测量两个分子间基序的FRET比...
人类免疫缺陷病毒（HIV）包膜糖蛋白（Env）是开发保护性疫苗的主要靶标。Env 上广泛的 N-连接糖基化可能影响其效力、稳定性和表达产量，表达宿主会影响糖基化程度和类型。本研究报道了候选 C 亚型免疫原 CO6980v0c22 gp145（目前处于 I 期临床试验）在 CHO-K1 和 Expi293F 两种宿主细胞中生产的糖基化...
糖基化是受生物工艺参数和细胞生理状态影响的单克隆抗体重要质量属性。本研究开发了基于凝集素的生物层干涉（LBLI）方法，用于相对评估Fc糖基化免疫球蛋白G（IgG）的半乳糖基化和岩藻糖基化水平。在15 L生物反应器中改变工艺条件重组表达Fc糖基化IgG并收获产物，验证了LBLI对不同样品的可靠性、稳健性和适用性，并以液相色谱-质谱（L...
开发能够检测蛋白质特定糖基化模式的化学传感器，为癌症早期检测提供了有力手段。然而，由于识别蛋白所连糖链的受体难以发现，这一策略很少被探索。本文描述了一种简单方法，可将适配体选择导向糖蛋白的糖结构，并以前列腺特异性抗原（PSA）为模型靶标。利用该策略，我们鉴定到一个适配体（PSA-1），它以合理亲和力结合 PSA 的糖基部分（解离常数...
本文报道了一种基于糖基化诱导淀粉样纳米纤维与茜素黄R电聚合物纳米生物复合材料的电化学生物传感器。将牛血清白蛋白（BSA）与果糖在磷酸盐缓冲液中孵育20周，经糖基化反应形成淀粉样纳米纤维（AMLNFibs），并用硫黄素T荧光、动态光散射（DLS）和透射电镜（TEM）表征其形貌与尺寸。随后将AMLNFibs滴涂于玻碳电极（GCE）表面，...
本综述系统评述了凝集素在分析化学中的应用。凝集素是一类能特异性、可逆结合碳水化合物及其生物大分子糖基的非免疫性蛋白质。文章首先讨论凝集素的来源、结构、分类及其对单糖、寡糖和复杂糖结合物的识别规律，指出其特异性受碳水化合物识别域、亚基多价性、结合位点空间排列及多价相互作用影响。随后重点介绍凝集素亲和层析、组织与细胞化学染色、凝集素印迹...
碳水化合物调控感染等生物过程，糖基化聚合物和纳米材料因簇糖苷效应而具有增强亲和力，可用于功能探测、预防治疗或诊断。本研究在接枝密度、缓冲液稳定性和凝集素结合检测背景下，考察聚合物结构对金纳米颗粒涂层的影响。采用RAFT聚合制备末端含硫醇的聚（低聚乙二醇甲基丙烯酸酯）（POEGMA）和聚（N-乙烯吡咯烷酮）（PVP），用于固定到金表面...
蛋白质糖基化异常是肿瘤发生的重要特征，可影响细胞黏附、迁移和转移。本研究探讨N-糖基化对乳腺癌中Herceptin（曲妥珠单抗）与HER2蛋白结合，以及癌细胞对化疗药多柔比星（DXR）和生长因子（EGF、IGF-1）敏感性的影响。利用石英晶体微天平（QCM）生物传感器评估Herceptin与重组HER2蛋白及癌细胞表面的结合动力学（...
本文首次将无标记电化学PSA检测与PSA糖谱分析应用于前列腺癌（PCa）血清样本。研究采用电化学阻抗谱（EIS），在金电极表面固定抗PSA抗体捕获PSA，并用凝集素对同一表面捕获的PSA进行糖基化分析。通过优化封闭剂，提高了固定抗PSA抗体生物传感器的选择性。该传感器可检测低至100 ag/mL的PSA，线性范围为100 ag/mL...
本研究制备了可识别抗体糖链中两种不同碳水化合物（半乳糖和唾液酸）的阻抗式凝集素生物传感器。首先，利用含羧基甜菜碱末端硫醇的自组装单分子层（SAM）修饰金表面，用于共价固定凝集素并抵抗非特异性蛋白吸附。随后，将黑接骨木凝集素（SNA）或蓖麻凝集素（RCA）共价连接至SAM，并通过电化学阻抗谱、循环伏安、石英晶体微天平、接触角、Zeta...
本研究报道了通过哺乳动物细胞瞬时转染表达并纯化两种 Fcγ 受体胞外域 CD16a 和 CD64，用于开发单克隆抗体生产批次质量控制的定量检测方法。作者将带 C 端 His 标签的 CD16a 和 CD64 胞外域经 IMAC 和 SEC 纯化，以胺基偶联或抗 His 抗体定向捕获方式固定在 CM5 SPR 芯片表面，实时监测其与曲...
本文报道了一种基于石英晶体微天平（QCM）的凝集素型悬浮细胞生物传感器，用于无标记实时测定癌细胞表面蛋白–碳水化合物相互作用的结合动力学。该传感器以羧基化 LNB-QCM 芯片为基底，经 EDC–sulfo-NHS 原位活化后，通过胺偶联共价固定刀豆蛋白 A（Con A），并用乙醇胺封闭残余活化羧基。随后，K562 和 Jurkat...
针对实体瘤生物治疗中糖基化改变靶向策略，作者开发了一种新型细胞生物传感器，用于在更接近体内环境的全细胞表面评估凝集素与癌细胞相互作用。将转移性结直肠癌细胞 SW620 和非转移性 SW480 培养于组织培养兼容聚苯乙烯包被的生物传感器芯片表面，并置于石英晶体微天平（QCM）装置中，实时监测多种凝集素的结合动力学。罗马蜗牛凝集素（HP...
Ch14.18 是靶向双唾液酸神经节苷脂 GD2 的鼠-人嵌合单克隆抗体，已在儿童高危神经母细胞瘤治疗中显示疗效。为应对工艺变更和制造放大带来的产品可比性问题，需对电荷异质性、糖基化谱、分子状态与聚集、Fcγ 受体结合亲和力及功能活性进行系统表征。本文报道了内部开发并确认的成像毛细管等电聚焦（imaged cIEF）用于电荷异质性，...
白介素-7（IL-7）与其α受体 IL-7RR 的相互作用对 B 细胞和 T 细胞的发育、存活及稳态至关重要。人 IL-7RR 的 N-糖基化通过变构机制使其对人 IL-7 的结合亲和力较非糖基化受体提高约 300 倍，而 IL-7RR 的 N-糖链并不直接参与结合界面。本研究采用表面等离子共振（SPR）光谱，系统解析 IL-7 与...