Analytical and bioanalytical chemistry
2021
Lu H, Zhu L, Li W, Hu S 等 6 人
CD147参与多种生理过程,并在肿瘤转移中发挥重要作用,其糖基化状态决定多种生物学功能。目前几乎没有可用于活细胞中检测CD147糖基化的传感器,因此迫切需要开发选择性、连续性的细胞成像生物传感器。基因编码荧光共振能量转移(FRET)传感器为分析提供了新途径。作者设计并构建了新型基因编码FRET蛋白,通过测量两个分子间基序的FRET比...
The Plant journal : for cell and molecular biology
2021
Isoda R, Yoshinari A, Ishikawa Y, Sadoine M 等 7 人
植物激素在植物生长、发育、生理过程及环境适应中发挥关键作用,其信号网络高度复杂且相互交织。因此,不仅需要了解激素的产生部位、运输方式以及感知机制,还需要以理想上的非侵入方式定量监测其在组织与细胞中的分布和动态变化。本文系统总结了当前可用于定量和可视化植物激素分布与动态的多种工具,包括转录报告系统、基于蛋白降解的传感器、荧光素酶报告系...
The international journal of biochemistry & cell biology
2018
Liu Y, Chen LY, Zeng H, Ward R 等 13 人
大麻素受体1(CB1)主要表达于神经系统,调控学习记忆、疼痛和能量代谢,但缺乏直接测量其激活的方法。本研究构建了一种CB1分子内荧光共振能量转移(FRET)传感器,通过监测第三胞内环与C端尾之间的结构变化来测量CB1激活。CB1激动剂诱导FRET信号随时间和浓度增加,对应第三胞内环与C端尾距离缩短,并伴随胞内Ca2+动员、cAMP积...
Nature communications
2018
Jepsen MDE, Sparvath SM, Nielsen TB, Langvad AH 等 7 人
荧光RNA适配体可用于细胞内RNA分子追踪和生物传感器构建。基于荧光蛋白的FRET已用于检测构象变化,但尚未用于荧光RNA适配体。本文利用单链RNA折纸支架开发了基于RNA适配体的FRET(apta-FRET)系统。为实现FRET,将Spinach和Mango荧光适配体在RNA支架上近距离排列,并合成新荧光团YO3-biotin以提...
Philosophical transactions of the Royal Society of London. Series B, Biological sciences
2016
Gründling A, Lee VT
信号核苷酸是细菌快速协调细胞通路并适应环境变化的关键分子。过去十年,真核与细菌细胞中相继发现多种新的信号核苷酸,推动该领域快速发展。本文综述核苷酸信号网络的基本原理,总结导致新信号核苷酸发现的重要工作,并重点介绍当前用于快速鉴定核苷酸特异性受体蛋白的方法与资源。文章说明信号核苷酸由环化酶和磷酸二酯酶/水解酶合成与降解,其胞内水平受环...
Bioscience, biotechnology, and biochemistry
2016
Kikuta S, Hou BH, Sato R, Frommer WB 等 5 人
海藻糖是哺乳动物细胞中的应激保护剂和自噬诱导剂,但其胞内有效浓度处于微摩尔至毫摩尔范围,传统 HPLC 等碳水化合物检测方法最低可测浓度不低于 1 mM,且细胞提取过程可能造成降解,难以实现微尺度、非破坏性定量。本文报道一种基于 Förster 共振能量转移(FRET)的遗传编码海藻糖监测技术。作者将 CFP 与 mVenus 分别...
The Journal of biological chemistry
2014
Swanson CJ, Sivaramakrishnan S
α-螺旋是蛋白质中普遍存在的二级结构,通常需三级或四级相互作用稳定。自核糖核酸酶A孤立C肽中意外观察到α-螺旋形成以来,越来越多证据表明约0.2%的蛋白质含有孤立稳定单α螺旋结构域(SAH)。这些SAH结构域提供对正常蛋白功能至关重要的独特结构特征。部分SAH结构域含有特征性ER/K基序,即约4个连续谷氨酸后接约4个连续精氨酸或赖氨...
Trends in microbiology
2014
Jiang T, Gao C, Ma C, Xu P
乳酸利用使微生物能够以乳酸为碳源,乳酸氧化酶在该途径中起关键作用。本文综述了微生物乳酸利用酶、乳酸利用诱导的致病机制以及乳酸利用操纵子调控的最新进展。乳酸氧化酶主要包括NAD依赖型乳酸脱氢酶(nLDH)和不依赖NAD的乳酸脱氢酶(iLDH),其中iLDH通常以黄素为辅因子,是微生物体内乳酸氧化的主要酶类。根据手性特异性和天然电子受体...
Science signaling
2013
Takahashi T, Shibasaki T, Takahashi H, Sugawara K 等 8 人
本文研究抗糖尿病磺脲类药物(SU)与cAMP协同激活Epac2A的机制。作者利用MIN6-K8s细胞中的Epac2A FRET荧光传感器,检测8-pCPT-2'-O-Me-cAMP-AM(8-pCPT)及多种SU药对Epac2A的激活。结果显示8-pCPT浓度依赖性地降低FRET效率;格列本脲、格列吡嗪、乙酰己脲在≥10 μM,格列...