本文报道了一种基于生物素化反应和亚甲基蓝（MB）负载金属有机框架（MOFs）信号放大的电化学“信号开启”检测法，用于检测半胱天冬酶-3（caspase-3）并评估细胞凋亡。以锆基 UiO-66-NH2 MOFs 为纳米载体负载电活性 MB 分子；重组六组氨酸（His6）标签链霉亲和素（rSA）通过 His6 标签与 MOF 表面金属...
超极化129Xe MRI技术向临床推进，显示其在诊断成像中的价值。129Xe MRI中可响应特定生物靶标的对比剂被称为生物传感器，其种类不断增多。直接功能化载氙大环（如cryptophane类）适合定位成像，可在结合事件前后提供对比；非共价功能化体系（如葫芦脲和环糊精类）则具有商业可得性和适合CEST成像的交换动力学。本文报道了首个...
蛋白化学生物素化及链霉亲和素或抗生物素捕获常作为将蛋白固定于生物传感器表面的可控替代方案。生物素化可能阻断感兴趣相互作用位点，降低表观活性；最小生物素化可减轻活性损失，但若标记参与结合的氨基酸仍可能阻断结合位点。本文以低亲和力 Fcγ 受体为模型，开展最小标记反应条件优化研究。该类蛋白在 IgG 结合活性位点含多个赖氨酸，适合研究最...
以睾酮免疫双峰驼后，构建了重链抗体可变域（VHH）或纳米抗体（Nb）噬菌体展示库。纳米抗体分子量小（15 kD）、溶解性好、稳定性高、亲和力和特异性高、免疫原性低，是下一代诊断和医学应用的有前景工具。睾酮是生殖激素，在正常心脏功能中起重要作用，也是多种疾病的高预测标志物。本文成功开发了一种基于电化学阻抗谱（EIS）和纳米抗体的简单灵...
本文报道了四种生物素化 Fcγ 受体（FcγR）胞外域的生产及其在链霉亲和素生物传感器表面上的稳定捕获。受体生物素化采用哺乳动物细胞共转染策略：将编码 FcγR 胞外域（融合生物素受体肽 BAP）和 BirA 酶的质粒共同转染细胞，实现胞内定点生物素化，并与标准体外酶法生物素化在生物素化水平和产量方面进行比较。两种策略制备的生物素化...
蛋白纳米纤维因自组装容易和表面化学多样而优于其他纳米结构，但高效、通用的组装后功能化方法仍是重要挑战。本文提出一种基于生物素化和巯基化的通用策略，对乳清蛋白自组装形成的蛋白纳米纤维进行多功能化。生化表征揭示了功能化对纳米纤维表面的影响，为理解纳米结构表面化学变化提供了依据。这些方法可用于在乳清蛋白纳米纤维上修饰多种组分，例如荧光量子...
本研究利用表面修饰的镍网评估了金属网器件（MMD）传感器的可行性。通过硫醇-烯点击反应（即 Michael 加成反应），将生物素固定在由硅和镍构成的传感器表面；在马来酰亚胺化表面上，利用 X 射线光电子能谱确认了生物素化。采用石英晶体微天平（QCM）和 MMD 传感器评价链霉亲和素与生物素化表面的结合，两种技术得到相近的结合常数。通...
结合抗体恒定区的亲和蛋白是生物技术中重要工具。本研究通过蛋白质工程扩展免疫球蛋白结合蛋白库，提高广泛使用的金黄色葡萄球菌蛋白A来源Z domain与小鼠IgG1（mIgG1）的结合强度。针对58个氨基酸三螺旋束Z domain的7个位点进行单点或双点氨基酸替换，共构建170个变体，在大肠杆菌中表达并检测其对一组mIgG1单克隆抗体的...
本研究利用Biacore新型可再生链霉亲和素捕获（CAP）传感器芯片，系统考察目标配体生物素化的最小化条件。作者比较了常用胺基生物素化与较少使用的羧基生物素化策略，评估了生物素化试剂与蛋白摩尔比、反应时间、游离生物素去除程度以及不同脱盐方法对链霉亲和素表面捕获效率的影响。结果表明，过度生物素化会使一个配体分子占据多个链霉亲和素位点并...
本文报道了通过电聚合吡咯-生物素或芘-生物素 π-堆积非共价修饰单壁碳纳米管（SWCNTs）构建葡萄糖生物传感器。利用亲和素-生物素高亲和作用，将生物素化葡萄糖氧化酶（B-GOX）固定于生物素化纳米管表面。通过改变 SWCNT 沉积量和亲和素/B-GOX 层数，研究两种构型的安培性能。结果表明，固定酶量随纳米管量和酶层数线性增加，体...