利用无标记光学生物传感器对蛋白-小分子结合相互作用进行高通量筛选具有挑战性，因为检测信号常与实验噪声量级相近。本文提出一种新型自参考外腔激光器（ECL）生物传感器方法，在消除热噪声的同时实现亚皮米波长精度下的高分辨率和高灵敏度。利用该自参考 ECL 生物传感器，我们演示了多种固定化蛋白靶标与小分子结合的检测，其结合亲和力或抑制常数覆...
为提升表面等离子共振（SPR）生物传感器的通量，本文提出一种在线迭代优化与模型判别方法，用于在保持动力学参数置信度的同时减少实验时间和材料消耗。此前算法基于简单 Langmuir 模型计算参数置信度并预测最优注入，但该模型未包含快速相互作用中可能出现的质量传输限制（MTL），若 MTL 显著而仍用简单模型，所得结合/解离常数会产生偏...
锌离子在缺血性卒中、癫痫持续状态和创伤性脑损伤后的细胞毒性作用仍有争议，但可能源于线粒体功能障碍。本文报道了一种基于人碳酸酐酶II（CA II）变体的激发比率荧光生物传感器，并将其表达于线粒体基质，用于定量成像其中的游离锌水平。在PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞培养系中，作者测得线粒体基质平均游离锌浓度约为0.2 pM。随后在细胞氧葡萄糖...
基于片段的药物发现是发现候选药物的有效策略。然而，片段化合物亲和力弱，需要核磁共振（NMR）或X射线晶体学等高灵敏度生物物理技术来鉴定活性片段，因此筛选小片段库的优势部分被生物物理分析的高成本抵消。本文报道了一种基于表面等离子共振（SPR）生物传感器的片段筛选方法。为降低假阳性检出率，作者提出一种将多重参考扣除与配体效率相结合的数据...
本文报道了一种用于SensíQ Pioneer表面等离子共振（SPR）生物传感器的新型分析物注射方法，称为FastStep。该方法通过在反应流池入口前立即合并缓冲液流和样品流，使仪器能够仅从单个分析物样品自动产生二倍或三倍稀释系列，分别包含七个或五个浓度，从而覆盖约100倍浓度范围。作者利用蔗糖注射证明各浓度阶梯在起始时间和响应水平...
本研究利用Biacore新型可再生链霉亲和素捕获（CAP）传感器芯片，系统考察目标配体生物素化的最小化条件。作者比较了常用胺基生物素化与较少使用的羧基生物素化策略，评估了生物素化试剂与蛋白摩尔比、反应时间、游离生物素去除程度以及不同脱盐方法对链霉亲和素表面捕获效率的影响。结果表明，过度生物素化会使一个配体分子占据多个链霉亲和素位点并...
本文评估了富士胶片新型 AP-3000 表面等离子共振（SPR）生物传感器在动力学分析和片段筛选中的性能。作者以碳酸酐酶 II（CAII）为模型体系，表征了 10 种磺酰胺类小分子抑制剂，分子量 98–341 Da，亲和力约跨越 10000 倍（0.4 mM 至 20 nM）。虽然 AP-3000 所得数据总体与 Biacore T...
由蛋白框架与合成荧光团构成的半合成荧光生物传感器是特异性检测生物相关分子的重要分析工具。本文报道一种一步构建开式荧光半合成生物传感器的新方法。该策略基于配体导向甲苯磺酸酯（LDT）化学，这是一种亲和引导的蛋白标记方案，可位点特异性地将合成探针引入蛋白表面，同时释放亲和配体。作者设计了一类淬灭配体导向甲苯磺酸酯（Q-LDT）试剂，通过...
人碳酸酐酶II（hCAII）是锌金属酶，其活性位点含由三个组氨酸配位的Zn2+。本文以hCAII为模型，报道了一种129Xe-cryptophane生物传感器与hCAII复合物的X射线晶体结构。129Xe具有自旋1/2核、水中大于200 ppm化学位移窗口和26%天然丰度，可经激光极化将MRI信号增强约10000倍。cryptoph...