Probing coenzyme A homeostasis with semisynthetic biosensors.
辅酶A（CoA）是代谢核心辅因子，但缺乏在活细胞内测量其浓度的方法。本文报道首个用于测定哺乳动物细胞不同细胞器中游离CoA的半合成生物传感器。该传感器基于Snifit概念，由工程化GFP–HaloTag融合蛋白与荧光配体组成：HaloTag被细胞可渗透的Halo-MaP-TAZ探针特异性共价标记，探针含MaP荧光团和三唑（TAZ）配...
Semisynthetic biosensors for mapping cellular concentrations of nicotinamide adenine dinucleotides.
本文报道了一类用于定量活细胞中游离烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）及还原型/氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH/NADP+）比值的半合成荧光生物传感器。传感机制是通过 NAD(P) 与传感器蛋白组分结合，调控两个合成荧光团的空间距离，从而改变荧光共振能量转移（FRET）效率。该传感器具有大动态范围、长波长激发、pH 不敏感、...
In Situ Construction of Protein-Based Semisynthetic Biosensors.
由蛋白支架与人工小分子组成的化学构建生物传感器，近年来被视为特异性检测并实时监测细胞内多种生物分子或生物事件的重要分析工具。传统半合成生物传感器通常在试管中制备，随后借助显微注射或细胞穿透肽等侵入性方法导入细胞。随着生物正交蛋白偶联技术的快速发展，现已能够在活细胞内直接原位构建此类半合成生物传感器，从而为生命科学研究提供前所未有的工...
Quenched ligand-directed tosylate reagents for one-step construction of turn-on fluorescent biosensors.
由蛋白框架与合成荧光团构成的半合成荧光生物传感器是特异性检测生物相关分子的重要分析工具。本文报道一种一步构建开式荧光半合成生物传感器的新方法。该策略基于配体导向甲苯磺酸酯（LDT）化学，这是一种亲和引导的蛋白标记方案，可位点特异性地将合成探针引入蛋白表面，同时释放亲和配体。作者设计了一类淬灭配体导向甲苯磺酸酯（Q-LDT）试剂，通过...