针对 PCR 后病毒 DNA 检测或基因突变诊断常需凝胶电泳和测序、耗时较长的问题，本研究提出一种简便构建 DNA 生物传感器的策略。以铂电极为基底，通过循环伏安法电化学合成聚(3,4-乙烯二氧噻吩)（PEDOT）双层膜：第一层以聚苯乙烯磺酸钠（PSS）为模板形成 PEDOT:PSS，第二层在无 PSS 条件下沉积 PEDOT，以改...
本研究对一种通过简单分子组装程序构建的 HRP-AuNPs/PEDOT:BSA/Pt 电化学生物传感器进行了详细表征。该传感器以铂电极为基底，利用牛血清白蛋白（BSA）作为模板电化学聚合 3,4-乙撑二氧噻吩（EDOT），形成导电 PEDOT:BSA 膜；金纳米颗粒（AuNPs）通过 Au-S 相互作用稳定附着于 PEDOT 噻吩环...
本文报道了一类用于定量活细胞中游离烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）及还原型/氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH/NADP+）比值的半合成荧光生物传感器。传感机制是通过 NAD(P) 与传感器蛋白组分结合，调控两个合成荧光团的空间距离，从而改变荧光共振能量转移（FRET）效率。该传感器具有大动态范围、长波长激发、pH 不敏感、...
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）对多种细胞过程至关重要，并在真核细胞的不同亚细胞区室中分布。由于常规检测方法通常需要细胞破碎和分级分离，难以直接检测和相对定量这些独立的 NAD+ 池。本文描述了一种免疫化学方法，用于可视化和相对定量亚细胞 NAD+ 池。该方法依赖 poly(ADP-核糖)聚合酶 1（PARP1）消耗 NAD+ 的活...
荧光生物传感器 Frex 近期被提出用于定量活细胞内 NADH 浓度。本文采用时间积分和时间分辨荧光光谱，对纯化 Frex 蛋白在 NAD+ 存在及不同 pH 下的响应进行表征，以评估其体内应用潜力。结果显示，Frex 荧光对 NADH 的依赖可用 Hill 函数描述，半最大响应浓度 KD 约 4 μM，Hill 系数 n 约 2。...
NADH 是多种代谢反应中必需的氧化还原辅因子，胞质 NADH–NAD+ 氧化还原状态是糖酵解的关键参数。传统 NADH 测定依赖化学分析或自荧光成像，无法在单个活细胞的胞质中特异性评估 NADH。作者将细菌 NADH 结合蛋白 Rex 与绿色荧光蛋白变体环状置换 T-Sapphire 融合，构建遗传编码荧光生物传感器 Peredo...
3-羟基丁酸是血液主要酮体之一，也是诊断糖尿病酮症酸中毒的关键指标。本文报道了一种基于3-羟基丁酸脱氢酶的电化学生物传感器，用于快速、简便、灵敏地检测3-羟基丁酸。该传感器以丝网印刷碳电极为基底，利用单壁碳纳米管（SWCNT）在电极表面固定辅因子NAD+。作者通过电化学和电子显微镜验证了NAD+–SWCNT共轭的形成，并采用循环伏安...
本研究报道了一种简便方法，通过氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）腺嘌呤基团与多壁碳纳米管（MWCNTs）之间的π-π堆积作用，将NAD+非共价固定于MWCNTs表面，构建NAD+/MWCNT复合作为集成脱氢酶电化学生物传感器的电子换能器。X射线光电子能谱和循环伏安结果表明，NAD+稳定吸附于MWCNTs上。以葡萄糖脱氢酶（G...
本文报道了一种基于导电聚合物聚-5,20-50,200-噻吩-30-羧酸（pTTCA）与多壁碳纳米管（MWNT）复合膜修饰金电极的安培法乳酸生物传感器。乳酸脱氢酶（LDH）和氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）被共固定于pTTCA/MWNT复合膜上，其中酶通过氨基与膜中羧基形成共价键而稳定固定。作者采用石英晶体微天平（QCM）、扫...
本文提出一种基于静电作用和配位相互作用的“分子乐高”策略，在电极表面逐层组装氧化还原介质、辅酶、酶和稳定聚电解质单分子层。首先将含羧基的取代硝基芴酮吸附于玻璃碳或金电极表面，形成氧化还原介质单分子层；随后通过钙离子在介质羧基/羟胺基团与辅酶 NAD+ 磷酸基之间形成配位桥，使 NAD+ 定向固定；再借助葡萄糖脱氢酶（GDH）对 NA...