Genetically encoded redox biosensor system for H
急性髓系白血病（AML）化疗常通过诱导活性氧（ROS）过量杀伤肿瘤细胞，而H2O2在细胞内呈区室化动态分布。外源化学荧光探针可能干扰细胞代谢，遗传编码荧光传感器可实时、动态、低扰动地检测活细胞内ROS。本研究以HyPer和TriPer为H2O2传感模块，结合核定位序列（NLS）、线粒体定位序列（MLS）和内质网定位肽，通过慢病毒转染...
Flow Cytometry Analysis of Free Intracellular NAD
本文描述将流式细胞术与遗传编码靶向荧光生物传感器相结合，用于测定哺乳动物细胞内氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）在亚细胞区室中的可用性。游离NAD+的局部浓度会影响依赖NAD+的酶，如sirtuin去乙酰化酶、PARP/ARTD家族成员和环状ADPR水解酶家族成员。许多现有方法难以将各亚细胞区室中的游离NAD+与蛋白结合态NAD...
Compartment-Specific Poly-ADP-Ribose Formation as a Biosensor for Subcellular NAD Pools.
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）对多种细胞过程至关重要，并在真核细胞的不同亚细胞区室中分布。由于常规检测方法通常需要细胞破碎和分级分离，难以直接检测和相对定量这些独立的 NAD+ 池。本文描述了一种免疫化学方法，用于可视化和相对定量亚细胞 NAD+ 池。该方法依赖 poly(ADP-核糖)聚合酶 1（PARP1）消耗 NAD+ 的活...
Biosensor reveals multiple sources for mitochondrial NAD⁺.
烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是去乙酰化酶（sirtuins）和多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARPs）等 NAD+ 消耗酶的关键底物，这些酶分布于细胞核、胞质和线粒体。亚细胞区室中 NAD+ 浓度的波动被认为可调节相应酶活性，但长期以来缺乏直接测量细胞内区室化游离 NAD+ 的方法。本文报道了一种基因编码荧光生物传感器，用于直接监...