Monitoring Nrf2/ARE Pathway Activity with a New Zebrafish Reporter System.
在多种细胞保护机制中,真核细胞依赖 Nrf2 转录因子介导的复杂转录程序,通常在氧化应激等生物胁迫下被激活。近年来,Nrf2 作为主调控因子在癌症、炎症性疾病和年龄相关神经退行性疾病等领域的重要性日益凸显。本文报道并表征了一种新型 Nrf2/ARE 通路生物传感器转基因斑马鱼系。该品系在早期发育阶段呈现动态的时空表达谱,对已知 Nr...
在多种细胞保护机制中,真核细胞依赖 Nrf2 转录因子介导的复杂转录程序,通常在氧化应激等生物胁迫下被激活。近年来,Nrf2 作为主调控因子在癌症、炎症性疾病和年龄相关神经退行性疾病等领域的重要性日益凸显。本文报道并表征了一种新型 Nrf2/ARE 通路生物传感器转基因斑马鱼系。该品系在早期发育阶段呈现动态的时空表达谱,对已知 Nr...
内分泌干扰物(EDCs)可模拟或干扰激素功能。雌激素类内分泌干扰物(eEDCs)干扰内源性雌激素信号通路,动物与人类流行病学研究提示胚胎/早期暴露与神经功能障碍存在因果关联,但其分子和细胞机制仍不清楚。转基因(TG)斑马鱼模型作为新途径方法(NAMs),有助于识别 EDCs 的作用模式(MoAs)及其对组织发育和功能的影响。雌激素生...
污水处理厂(WwTW)出水的雌激素活性存在时间和空间差异,但少有研究量化这种差异对鱼类生物响应的影响。本研究采用雌激素响应元件-绿色荧光蛋白(ERE-GFP)转基因斑马鱼(Danio rerio),对三种不同WwTW出水(50%和100%)进行暴露,并以10 ng/L炔雌醇(EE2)为阳性对照,测定孵化率/存活率、靶组织或全胚胎gf...
斑马鱼因与人类基因同源性高、透明、易繁殖且早期无需喂食,被广泛用于有毒物质检测。传统斑马鱼毒性试验主要依赖致死率和形态或行为变化,敏感性有限。为提高检测灵敏度,作者将基于荧光共振能量转移(FRET)的凋亡生物传感器 sensor C3 引入斑马鱼基因组,构建全身表达 sensor C3 的转基因传感器斑马鱼 Tg(ubi:senso...
活性氧(ROS)在细胞信号、免疫和凋亡中具有重要作用,但过量ROS若未被内源性抗氧化系统清除,会造成细胞损伤和疾病。环境压力因素也可导致ROS过量产生,引发氧化应激(OS)及组织毒性。本研究旨在建立一种不受组织特异性基因调控限制的稳定转基因斑马鱼系,使其能够在全生物体水平实时读出不同组织在暴露于多种OS诱导环境污染物和条件后的OS状...
雌激素在多种发育过程中发挥基本作用,暴露于雌激素模拟化学物质与野生动物和人类人群中的多种不良健康效应相关。环境中雌激素样化学物质常以混合物形式存在并可产生加性效应,但风险评估通常针对单一化学物质,且很少考虑动物的暴露历史。本研究构建了一种新型转基因斑马鱼模型 ERE-Kaede-Casper,该模型在皮肤色素缺失突变背景下携带可光转...
本文报道了一种用于检测水体重金属污染的转基因斑马鱼(Danio rerio)生物传感器。该传感器将来源于亚洲绿贻贝(Perna viridis)的金属硫蛋白MT-Ia1启动子与红色荧光报告基因DsRed2连接,构建pTol2-MT-Ia1-DsRed2盒,并借助Tol2转座子载体显微注射入斑马鱼胚胎,培育至成熟。MT-Ia1启动子含...
斑马鱼胚胎毒性测试已成为检测环境污染的常用方法,但本研究显示,当斑马鱼胚胎暴露于高于环境标准限值的重金属时,并未出现可见的畸形、发育异常或死亡,说明传统胚胎毒性终点不适用于监测超过监管限值的环境重金属浓度。为获得可检测水生重金属的生物传感器,作者重建了包含斑马鱼金属硫蛋白(MT)启动子和增强绿色荧光蛋白(EGFP)的金属敏感载体,并...
糖皮质激素(GCs)通过糖皮质激素受体(GR)结合靶基因启动子或内含子中的糖皮质激素反应元件(GREs)调控多种细胞过程。本文报道了一株携带9个GRE串联重复驱动增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因编码序列的转基因斑马鱼品系。该品系在多个已知GC响应器官中呈现强荧光,并且由于敏感性增强,发现了鳍、眼和耳囊等新的GC响应组织区室。成...
转基因鱼类模型可为毒理学研究提供体内信息,是评估不同物质有害效应的潜在替代对象。本研究采用表达由肌球蛋白轻链启动子(Mylz2)驱动的不稳定红色荧光蛋白(DsRED)的转基因斑马鱼(Danio rerio)品系,提出一种用于环境生物监测的新研究工具。为验证MYO-RED品系,将鱼暴露于有机磷农药甲基对硫磷(MP)。通过体重、体长、条...
本研究构建了携带绿色荧光蛋白(GFP)和酪氨酸羟化酶(TH)启动子的质粒,并将 TH-GFP 构建体显微注射入斑马鱼胚胎细胞。受精后 3 天,GFP 开始在明确的儿茶酚胺能区域表达。作者将 TH-GFP 转基因斑马鱼作为活体生物传感器,用于评估常用滥用药物尼古丁和氯胺酮的效应。首先通过运动试验考察药物的一般兴奋作用:高浓度尼古丁(1...
模拟天然雌激素的环境化学物质对脊椎动物生殖系统具有明确的内分泌干扰效应,但其对其他组织和系统的影响仍了解不足。研究者利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的转基因斑马鱼,实时检测不同雌激素类化学物的效应。英国团队开发了一种更敏感的转基因斑马鱼生物传感器,用于评估潜在内分泌干扰物。早期转基因模型仅在特定组织或很高剂量下报告暴露。本研究在受精后...
环境雌激素是一类可干扰体内激素信号的内分泌干扰物,与人和野生动物生殖异常、疾病风险增加相关。现有雌激素检测系统多聚焦特定机制或生殖终点,难以全面评估其对多种组织系统的潜在健康影响。本研究旨在开发并应用一种高灵敏度转基因斑马鱼生物传感器模型,实时评估环境雌激素在完整生物体中的信号效应。作者构建了含三个串联雌激素响应元件(ERE)诱导启...
细胞色素P450(CYPs)在降解内源底物和解毒致癌物中具有重要作用,因此可作为评估水生环境中多环芳烃(PAHs)水平的生物标志物。本研究利用CYP1A1启动子驱动的绿色荧光蛋白(CYP-GFP)构建体,建立了转基因斑马鱼品系,用于检测多氯联苯(PCBs)毒性。实验采用0.02、0.04、0.08、0.4和0.8 μg/ml的PCB...