斑马鱼因与人类基因同源性高、透明、易繁殖且早期无需喂食，被广泛用于有毒物质检测。传统斑马鱼毒性试验主要依赖致死率和形态或行为变化，敏感性有限。为提高检测灵敏度，作者将基于荧光共振能量转移（FRET）的凋亡生物传感器 sensor C3 引入斑马鱼基因组，构建全身表达 sensor C3 的转基因传感器斑马鱼 Tg(ubi:senso...
尽管荧光分析方法已用于细胞内分析，但对细胞内蛋白酶的精确分析灵敏度较低，难以观察与癌症和神经退行性疾病相关的细胞凋亡。本研究首次提出一种基于金属增强荧光（MEF）的高灵敏生物传感器，用于检测蛋白酶。该传感器采用双功能金纳米颗粒（AuNP），通过单链DNA（ssDNA）和肽同时连接荧光团。当蛋白酶caspase-3特异性切割肽后，ss...
设计中性条件下稳定灵敏的鲁米诺基ECL分析平台备受关注。本文通过静电相互作用制备金纳米粒子功能化钴镍磷酸三维纳米冰淇淋（Au@Co3Ni3(PO4)4 NICs）。首先水热法合成Co3Ni3(PO4)4 NICs，并用聚乙烯亚胺（PEI）功能化；随后金纳米粒子（Au NPs）通过Au-N弱相互作用吸附于表面，构建Au@Co3Ni3(...
本研究构建了一种基于肽功能化上转换@二氧化硅纳米颗粒（UCNP@SiO2@Cy5-pep）的荧光共振能量转移（FRET）传感平台，用于体外和体内检测半胱天冬酶-9（Caspase-9）活性。作者设计了含Caspase-9特异性切割基序LEHD的Cy5标记肽，并通过共价偶联将其固定于UCNP@SiO2表面。UCNP@SiO2在980 ...
由生物分子和活细胞构成的生物传感器与全细胞生物传感器能够感知生物体系中的特定刺激，并将其转换为可测量信号。其中，基于荧光素酶的生物发光传感器在分子生物学和成像系统中应用广泛。本项目利用圆形排列策略设计并构建了一种用于检测和定量 Caspase-9 活性的荧光素酶生物传感器。光谱学结果表明，圆形排列导致该传感器结构发生改变。随后，研究...
凋亡是维持组织稳态和多种疾病发生发展中的关键过程，选择性检测凋亡细胞具有重要研究价值。本研究开发了一种基于生物发光的 Annexin V 凋亡检测生物传感器，将 Annexin V 对凋亡细胞表面磷脂酰丝氨酸（PS）的靶向识别能力与血清稳定突变体 Renilla 荧光素酶 RLuc8 的高灵敏生物发光信号相结合。作者构建了 Anne...
Caspase-3 激活是检测凋亡的关键替代标志物。为定量检测 caspase-3 活性，作者构建了含 caspase-3 切割位点的重组萤火虫荧光素酶生物传感器。当凋亡被诱导时，caspase-3 切割该生物传感器，使萤火虫荧光素酶活性提高 25 倍以上。该检测可方便地实时检测凋亡，有助于药物发现。作者筛选结核分枝杆菌 ESAT-...
许多抗癌药物旨在通过诱导凋亡杀死癌细胞，但用于测定这些产品生物活性的效价检测通常为细胞活力检测，无法区分细胞死亡与生长抑制。本文报道了一种基于细胞的荧光共振能量转移（FRET）生物传感器，用于测定诱导凋亡类抗癌药物的生物活性。该传感器由青色荧光蛋白（CFP）通过 caspase 3 和 caspase 8 特异性切割识别序列连接黄色...
本文制备了Annexin V（ANX）修饰的含磷脂酰丝氨酸的植烷三醇（PSPhy）立方体（cubosomes），作为增强检测凋亡膜的探针，用于模型膜和体外细胞系统。小角X射线散射（SAXS）和冷冻透射电镜（Cryo-TEM）表明，ANX-PSPhy立方体保留了PSPhy立方体的Pn3m立方对称性和立方相纳米颗粒特征。石英晶体微天平耗...
本文报道一种基于Apaf-1寡聚化和凋亡小体形成、利用分裂荧光素酶策略检测早期凋亡的新型全细胞生物传感器。将荧光素酶N端片段（1–416 aa）和C端片段（395–550 aa）分别融合至Apaf-1 N端，构建N-Luc–Apaf-1和C-Luc–Apaf-1表达载体，共转染HEK293T细胞。用阿霉素诱导凋亡后，线粒体释放细胞色...
本研究提出一种细胞成像检测方法，作为传统细胞毒性检测（如 MTS 检测）的替代方案，用于早期监测凋亡。研究选择磷脂酰丝氨酸（PS）与膜联蛋白 V（annexin V）之间的亲和相互作用作为凋亡监测参数。首先，利用表面等离子共振（SPR）生物传感器测定由不同摩尔组成（0–15%）PS 构成的磷脂双分子层中 annexin V 与 PS...
许多荧光探针依赖荧光蛋白对之间的荧光共振能量转移（FRET）来报告细胞事件。当融合传感蛋白响应细胞事件发生构象变化时，供体与受体之间的能量转移效率随之改变，因此可通过FRET效率变化关联目标分子或细胞过程。本文介绍基于结构的计算设计策略：利用候选FRET生物传感器各结构域的三维结构，对柔性连接区进行构象采样，并预测距离因子、取向因子...