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The Lumiptosome, an engineered luminescent form of the apoptosome can report cell death by using the same Apaf-1 dependent pathway.

Journal of cell science 2020 Hosseini ES, Nikkhah M, Hamidieh AA, Fearnhead HO 等 6 人

凋亡特征检测对理解细胞死亡方式至关重要。本文报道一种全细胞生物传感器,利用分裂荧光素酶互补法检测 Apaf-1 结合与凋亡体形成。通过 CRISPR-Cas9 技术将萤火虫荧光素酶 N 端(Nluc)和 C 端(Cluc)片段融合至人源 Apaf-1 N 端,在 HEK293 细胞中构建,获得可发光的凋亡体形式,命名为 Lumipt...

Optimization of Experimental Variables Influencing Apoptosome Biosensor in HEK293T Cells.

Sensors (Basel, Switzerland) 2020 Oladzad A, Nikkhah M, Hosseinkhani S

凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)分裂荧光素酶生物传感器已被用作检测早期凋亡的生物工具。此前,研究者通过细胞体系中多柔比星的作用以及无细胞体系中细胞色素c和ATP的添加,验证了该报告系统检测凋亡小体形成的功能。本研究建立了一种不依赖药物、细胞色素c/ATP的凋亡诱导方式,即依靠生物传感器自身表达诱导凋亡小体形成。在无药物处理条件下...

Design and development of a whole-cell luminescent biosensor for detection of early-stage of apoptosis.

Biosensors & bioelectronics 2012 Torkzadeh-Mahani M, Ataei F, Nikkhah M, Hosseinkhani S

本文报道一种基于Apaf-1寡聚化和凋亡小体形成、利用分裂荧光素酶策略检测早期凋亡的新型全细胞生物传感器。将荧光素酶N端片段(1–416 aa)和C端片段(395–550 aa)分别融合至Apaf-1 N端,构建N-Luc–Apaf-1和C-Luc–Apaf-1表达载体,共转染HEK293T细胞。用阿霉素诱导凋亡后,线粒体释放细胞色...