甾体微生物细胞工厂生产雄烯二酮（androst-4-ene-3,17-dione，AD）需要转录因子（TFs）参与代谢调控。然而，微生物细胞工厂缺乏可有效响应其代谢途径中 AD 的转录因子，且寻找和获得特异性响应 AD 的天然转录因子是一项复杂而繁重的任务。本研究基于结构引导的分子动力学（MD）模拟，设计了一种响应 AD 的人工转录...
本研究设计一种新型遗传电路，模拟铜绿假单胞菌 CadA/CadR 操纵子介导的重金属稳态机制，将天然操纵子中的 DNA 元件重新组合，并与增强型绿色荧光蛋白 eGFP 报告基因偶联，构建基础 NOT 型逻辑门 CadA/CadR-eGFP，以响应 Cd2+、Zn2+ 和 Pb2+。将化学合成的 CadA/CadR-eGFP 基因电路...
糖皮质激素（GCs）通过糖皮质激素受体（GR）结合靶基因启动子或内含子中的糖皮质激素反应元件（GREs）调控多种细胞过程。本文报道了一株携带9个GRE串联重复驱动增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因编码序列的转基因斑马鱼品系。该品系在多个已知GC响应器官中呈现强荧光，并且由于敏感性增强，发现了鳍、眼和耳囊等新的GC响应组织区室。成...
蛋白酶在病毒生命周期和成功感染建立中至关重要，简便监测其催化活性可显著促进新型抗病毒药物发现，并有助于阐明所研究病毒蛋白酶的作用与机制。作者实验室开发了一种在T细胞中监测HIV-1蛋白酶（PR）蛋白水解活性的检测体系，具有稳健读出。该检测利用原型转录因子Gal4，其由N端DNA结合域（DBD）和C端反式激活域（TAD）组成，并基于两...
人类暴露于遗传毒性物质构成健康威胁，快速评估其遗传毒性对化学品、药物开发及环境监测很重要。p21 是激活 p53 的主要下游靶基因，介导 DNA 损伤后细胞周期停滞，并被遗传毒性致癌物特异性上调。本研究建立基于人类细胞的生物传感器系统，用于快速检测遗传毒性物质。作者将受 p21 启动子控制的增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因稳定...
耐药HIV-1毒株的出现、现有抗HIV药物严重副作用以及有效疫苗缺乏，凸显开发新型抗病毒药物及其发现方法的需求。本文在T细胞中建立了一种监测HIV-1蛋白酶（PR）蛋白水解活性的检测系统。该系统基于诱导表达HIV-1 PR与Gal4 DNA结合域及反激活域融合蛋白；融合蛋白结合Gal4响应元件，仅在存在有效PR抑制剂（PI）时激活下...