为遏制由SARS-CoV-2引起的COVID-19疫情，亟需筛选能阻断冠状病毒复制与致病性的抑制剂。冠状病毒3C样蛋白酶（3CLpro，又称主蛋白酶Mpro）编码于复制酶多聚蛋白中，是抗病毒药物开发的重要靶点，因为其蛋白酶活性对形成功能性复制复合体必不可少。目前急需可用于筛选蛋白酶抑制剂并鉴定SARS-CoV-2复制酶产物的试剂。本...
随着 SARS-CoV-2 疫情持续，疫苗研发滞后使快速开发或重定位治疗药物尤为关键。蛋白类生物传感器可利用常规分子生物学设备完成筛选，避免昂贵化学探针。作者构建了针对 SARS-CoV-2 3C样半胱氨酸蛋白酶（3CLpro）的 FRET 生物传感器，由增强型青色荧光蛋白 eCFP 与黄色荧光蛋白 Venus 通过含 3CLpro...
冠状病毒（CoVs）感染人和多种动物，引起高流行且严重的疾病。3C样蛋白酶（3CLpro，又称主蛋白酶）对病毒复制至关重要，并参与病毒多蛋白切割和宿主免疫调节，是抗病毒药物开发的重要靶点。本研究以猪流行性腹泻病毒（PEDV）3CLpro为模型，鉴定影响酶活性的关键新残基。首先建立一种快速、灵敏、高效的荧光素酶生物传感器，用于在哺乳动...
本文报道了一种流动注射分析-石英晶体微天平（FIA-QCM）连续流质量生物传感器，用于实时、无标记研究蛋白酶抑制过程中的动态相互作用。传感器以金表面石英晶体为基底，先通过半胱胺自组装单分子层和戊二醛连接固定大豆胰蛋白酶抑制剂（TI），作为特异性识别元件；随后在磷酸盐缓冲液流动相中监测胰蛋白酶、糜蛋白酶和胃蛋白酶与固定 TI 的结合及...
为辅助设计下一代丙型肝炎病毒（HCV）药物，本研究利用表面等离子共振（SPR）生物传感器表征了NS3蛋白酶抑制剂与基因型1a、1b和3a NS3蛋白酶之间的相互作用动力学。线性机制型抑制剂VX-950（telaprevir）和SCH 503034（boceprevir）因可形成共价加合物而获益，但表观亲和力较弱：VX-950对1a、...
本研究利用表面等离子共振（SPR）生物传感器技术，对固定化全长丙型肝炎病毒（HCV）基因型1a NS3蛋白与配体的相互作用机制和动力学进行了表征。作者以NS3蛋白酶抑制剂系列及代表NS4A辅因子的肽段为分析物，发现NS3与NS4A及多种抑制剂的结合均呈异质性，可能反映NS3存在两种稳定构象。NS3–NS4A相互作用包含高亲和力（KD...
耐药HIV-1毒株的出现、现有抗HIV药物严重副作用以及有效疫苗缺乏，凸显开发新型抗病毒药物及其发现方法的需求。本文在T细胞中建立了一种监测HIV-1蛋白酶（PR）蛋白水解活性的检测系统。该系统基于诱导表达HIV-1 PR与Gal4 DNA结合域及反激活域融合蛋白；融合蛋白结合Gal4响应元件，仅在存在有效PR抑制剂（PI）时激活下...