Engineered Biosensors from Dimeric Ligand-Binding Domains.
生物传感器是合成生物学和代谢工程应用中的重要组成部分。本文报道了基于失稳二聚体配体结合域的第二代酿酒酵母地高辛和孕酮生物传感器,其通过配体诱导稳定发挥作用。该生物传感器由一个配体结合域单体融合 DNA 结合域、另一个融合转录激活域组成,在配体结合和受体二聚化后激活报告基因表达。在二聚界面引入失稳突变使生物传感器动态范围提高一个数量级...
生物传感器是合成生物学和代谢工程应用中的重要组成部分。本文报道了基于失稳二聚体配体结合域的第二代酿酒酵母地高辛和孕酮生物传感器,其通过配体诱导稳定发挥作用。该生物传感器由一个配体结合域单体融合 DNA 结合域、另一个融合转录激活域组成,在配体结合和受体二聚化后激活报告基因表达。在二聚界面引入失稳突变使生物传感器动态范围提高一个数量级...
本文通过理性修饰雌激素受体(ER)蛋白配体结合域(LBD)的氨基酸组成,调控其配体结合特性。作者将已知雌激素受体-配体复合物的序列比对、结构分析与计算模拟相结合,预测了若干具有改变结合特性的 ER 突变体。随后通过定点突变制备单点突变重组蛋白,并采用竞争结合实验验证其结合特性。结果表明,部分突变体对某些内分泌干扰化学物(EDCs)的...