In Vivo Detection of Cyclic-di-AMP in
环二腺苷酸(cyclic-di-AMP, CDA)是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中调控抗生素耐受、渗透调节、生物膜形成和毒力等多种细胞功能的重要第二信使。准确测定活菌内 CDA 浓度对理解其耐药机制和临床监测具有重要意义。本研究开发了一种新型 RNA 荧光生物传感器 bsuO P6-4,用于在金黄色葡...
环二腺苷酸(cyclic-di-AMP, CDA)是金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)中调控抗生素耐受、渗透调节、生物膜形成和毒力等多种细胞功能的重要第二信使。准确测定活菌内 CDA 浓度对理解其耐药机制和临床监测具有重要意义。本研究开发了一种新型 RNA 荧光生物传感器 bsuO P6-4,用于在金黄色葡...
表型异质性被认为会降低生物过程性能,即使培养物为单克隆。本研究在补料分批培养中评估了工程化异丙醇高产菌株 Cupriavidus necator 的稳健性及其质粒表达水平异质性。此前,eGFP 已被鉴定为 C. necator 中有前景的质粒表达报告分子。作者比较了三种工程菌株(异丙醇高产株、eGFP 表达株和异丙醇/eGFP 共表...
生物标志物的灵敏检测对疾病诊断和术后复查至关重要。非线性杂交链反应(NHCR)基于 DNA 自组装,可作为信号放大技术用于多种生物传感平台。本文提出一种无发夹 NHCR 流式细胞术免疫分析方法,用于前列腺特异性抗原(PSA)检测。在羧基磁珠(MBs)表面固定捕获抗体 Ab1,加入 PSA 后与生物素化检测抗体 Ab2 形成夹心复合物...
遗传编码氧化还原活性化合物生物传感器的发展推动了细胞内氧化还原活性研究新方法。此前作者利用遗传编码生物传感器 HyPer 定量测量活细胞内过氧化氢(H2O2)浓度。本研究改进该方法,用于比较不同表型人细胞在 H2O2 诱导外源氧化应激下胞外与胞质 H2O2 浓度梯度,从而评估抗氧化系统强度。实验使用稳定表达胞质 HyPer 的癌细胞...
DNA完整性对生命至关重要,细胞通过DNA修复通路清除化学和辐射损伤;碱基切除修复(BER)酶活性异常与癌症、耐药及神经退行性疾病相关,因此需要快速灵敏的检测工具。本文报道一种基于微信标(microbeacons, µBs)的酶活性检测方法。µB是将含单一位点特异性损伤的发夹形核酸探针固定于微球,并用荧光团或前荧光团修饰。目标蛋白处...
小分子 8-甲氧基-2-氧代-1,2,4,5-四氢环戊[de]喹啉-3-羧酸(2b)是一种反应性非荧光 Michael 受体,与硫醇反应后产生荧光,并可在水相中与 Eu3+ 自组装形成高效镧系天线。该性质使 2b 成为高选择性谷胱甘肽(GSH)生物传感器,可用于小鼠和人类免疫细胞(CD4+ T 细胞、CD8+ T 细胞和 B 细胞)...
本研究在 Cupriavidus necator 中研究质粒表达水平异质性,考察在假设增强质粒不稳定的严格培养条件下,通过质粒清除策略诱导的表达差异。比较了两种质粒清除策略在批次培养中的效率:添加利福平与升高培养温度。结果显示,将温度从30℃升至37℃是最有效的质粒清除策略。为获得质粒表达水平异质群体,先在37℃超最适温度下进行连续...
本研究将人肝癌细胞HepG2形成的三维球体作为类生物传感器细胞系统,用于检测化学物诱导的细胞毒性与遗传毒性。以机制明确的间接遗传毒性物苯并[a]芘(BaP)和2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶(PhIP)进行验证。培养3天的HepG2球体分别暴露于不同浓度BaP和PhIP 24 h与72 h。通过面积测量和FDA/...