DNA完整性对生命至关重要，细胞通过DNA修复通路清除化学和辐射损伤；碱基切除修复（BER）酶活性异常与癌症、耐药及神经退行性疾病相关，因此需要快速灵敏的检测工具。本文报道一种基于微信标（microbeacons, µBs）的酶活性检测方法。µB是将含单一位点特异性损伤的发夹形核酸探针固定于微球，并用荧光团或前荧光团修饰。目标蛋白处...
尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）是启动细胞碱基切除修复通路、维持基因组完整性的关键损伤修复酶，其活性异常与癌症、遗传病和免疫缺陷等疾病相关。本文建立了一种简单、稳健且低成本的生物传感平台，用于超灵敏检测 UDG 活性。该平台将碱基切除修复启动的引物生成与滚环扩增（RCA）相结合，并引入内切酶 IV（Endo IV）辅助信号放大。当存...
本研究开发了一种基于吡咯-dC（PdC）独特荧光性质的新型方法，用于测定甲酰胺嘧啶DNA糖基化酶（Fpg）活性。该策略利用PdC位于双链DNA中与8-氧代鸟嘌呤（8-oxoG）相对的碱基位置。初始状态下，双链DNA中的PdC因与邻近碱基发生有效堆积和碰撞猝灭而呈现低荧光信号。当Fpg存在时，其特异性切除8-oxoG并切割由此产生的无...
本文报道了一种用于检测纯化酶及无细胞提取物中碱基切除修复（BER）活性的新型多重检测方法。该方法首先通过快速且原创的程序，用荧光染料 Alexa 488 对磁性微珠进行编码，形成可区分的荧光条形码。随后，将含有 DNA 损伤位点的 DNA NanoBeacons（NBs）固定到荧光编码微珠表面；这些探针标记有 Cyanine 5（C...
DNA完整性不断受到内源和外源因素破坏，碱基损伤可引发突变、遗传病和癌症。生物体通过碱基切除修复（BER）等途径特异性修复无碱基位点、烷基化、氧化及脱氨基损伤。本文报道一种基于磁性微珠的荧光DNA纳米探针功能测定方法，用于检测BER酶活性。探针为发夹形寡核苷酸，3′端经生物素固定于链霉亲和素包被的磁性微珠，5′端标记Cyanine3...
尿嘧啶-DNA糖基化酶（UDG）是碱基切除修复途径中最重要的酶之一，可保护基因组免受内源性DNA损伤并维持基因组完整性，因此UDG活性的定量分析对生物分析具有重要意义。本文提出一种由氧化石墨烯（GO）表面吸附荧光标记发夹探针构成的新型生物传感器，用于UDG活性的同相检测。活性UDG可切除发夹探针中的尿嘧啶碱基，随后内切酶IV水解无碱...