Bidirectional coupling of neuronal Ca
一氧化氮(NO)与钙离子(Ca2+)是神经元信号中紧密互作的介质,但二者在原代神经元中的动态关系仍缺乏直接观察。本研究报道了一种双顺反子双生物传感器,将高灵敏度Ca2+成像探针jGCaMP8s与橙色荧光NO报告蛋白O-geNOps组合,并通过腺相关病毒(AAV)递送至原代海马神经元。作者建立了适合生理温度和氧分压的成像条件,因为这些...
一氧化氮(NO)与钙离子(Ca2+)是神经元信号中紧密互作的介质,但二者在原代神经元中的动态关系仍缺乏直接观察。本研究报道了一种双顺反子双生物传感器,将高灵敏度Ca2+成像探针jGCaMP8s与橙色荧光NO报告蛋白O-geNOps组合,并通过腺相关病毒(AAV)递送至原代海马神经元。作者建立了适合生理温度和氧分压的成像条件,因为这些...
多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)是调节多种脑功能的关键神经调质,常协同作用。由于缺乏高选择性观察其时空动态的技术,解析二者关系困难。尽管已开发检测 DA 的遗传编码荧光生物传感器,但其选择性不足,难以区分 DA 与 NE。本文报道了一种红色荧光遗传编码 GPCR 激活报告器 R-GenGAR-DA,用于检测 DA。具体而言,将环...
谷氨酸(Glu)是神经系统中神经元通讯的关键神经递质。体内研究表明,阿尔茨海默病(AD)患者脑内 Glu 浓度降低,且与致病性淀粉样蛋白-β(Aβ)的积累相关。然而,Aβ 肽对 Glu 释放水平的影响及其介导的 Glu 波动如何启动仍不清楚。本研究制备了一种 Glu 电化学生物传感器,并原位定量监测了 Aβ1-42 损伤的海马神经元...
谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统最重要的兴奋性神经递质之一,在神经信号转导中起关键作用,并与卒中、精神分裂症、阿尔茨海默病和帕金森病等多种神经疾病相关。目前尚缺乏有效方法特异性检测原代培养神经元释放的谷氨酸。本文报道了一种基于还原氧化石墨烯(RGO)的场效应晶体管(FET)生物传感器,其表面通过1-芘丁酸琥珀酰亚胺酯(PASE)连接子固...
背景:P/Q 型和 N 型电压门控钙通道(VGCC)是介导突触囊泡(SV)胞吐的主要亚型。异氟烷对 SV 胞吐的抑制程度以及 VGCC 亚型表达在不同脑区和神经递质表型间存在差异。作者假设 VGCC 亚型表达差异导致异氟烷的突触选择性突触前作用。方法:将荧光生物传感器 vGlut1-pHluorin 转染入培养大鼠海马神经元,采用定...
α7 烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)激活可改善海马依赖学习记忆,但机制不清。我们此前报道其激活以 PKA 依赖方式增强谷氨酸能突触传递。本研究用 FRET 生物传感器通过活细胞成像直接测量海马神经元胞内 cAMP。结果显示,在 α7 nAChR 正性变构调节剂 PNU-120596 存在下,α7 选择性激动剂胆碱使 F535...
基因编码的荧光共振能量转移(FRET)生物传感器已被成功用于在活细胞中可视化蛋白质活性。FRET 测量的敏感性和准确性直接取决于生物传感器的折叠效率、表达模式、灵敏度和动态范围。为提高 Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 IIα(CaMKIIα)FRET 传感器的折叠效率,作者利用易错聚合酶链式反应(PCR)扩增 CaMKIIα 基因...
脑细胞代谢与细胞内氧化还原(redox)平衡密切相关。谷氨酸能传递伴随神经元底物偏好改变。为此,作者研究培养海马神经元暴露于谷氨酸时的胞质氧化还原变化。神经元转染 HyPer,一种用于过氧化氢的基因编码氧化还原生物传感器,可实时成像氧化还原状态。与生物传感器还原相对应的荧光衰减速率,在低剂量谷氨酸(10 μM)以及药理学刺激 NMD...