呼出气中的甲醇（MeOH）具有非侵入性评估肠道菌群的潜力。本研究开发了一种用于气相 MeOH 的生化气体传感器（bio-sniffer），采用荧光法及酒精氧化酶（AOD）与甲醛脱氢酶（FALDH）的双酶级联反应。级联反应中，AOD 首先催化 MeOH 氧化生成甲醛，随后 FALDH 催化甲醛进一步氧化，同时还原 β-烟酰胺腺嘌呤二核...
高效体内再生 NADH 和 ATP 对优化高附加值化学品生产及合成代谢途径活性至关重要。目前，这类辅因子再生途径主要在体外测试和表征，但体外测量不能反映生理条件下的酶活性，可能产生误导。本文构建了一个用于测试和比较 NADH 再生系统的体内平台。通过删除大肠杆菌二氢硫辛酰胺脱氢酶基因 lpd，使丙酮酸脱氢酶和 2-酮戊二酸脱氢酶失活...
本研究开发了一种快速、灵敏的方法，用于检测并估算真菌合成醇氧化酶（alcohol oxidase, AOX）的活性。该方法利用AOX特异性氧化甲醇，生成等摩尔的甲醛（HCHO）和过氧化氢（H2O2）。一方面，甲醛与中性乙酰丙酮及铵盐溶液反应，逐渐生成黄色3,5-二乙酰-1,4-二氢吡啶（λ=420 nm；λex/em=390/470...
本研究对甲基营养酵母毕赤酵母（Pichia pastoris）进行单细胞分析，开发了一种用于检测异源酶产生甲醇的生物传感器。该传感器中，甲醇及其后续代谢产物可诱导位于甲醇诱导型启动子控制下的荧光蛋白基因表达。通过荧光显微图像定量分析，作者筛选了甲醇诱导型启动子与宿主菌株，并优化预培养和检测条件，以提高甲醇检出限。流式细胞分选（FAC...
水凝胶因能改善酶固定化性能而广泛用于生物传感。本研究在相同酶和测试条件下，直接比较了四种水凝胶—石墨烯纳米复合生物传感器的性能。醇氧化酶（AOx）分别包埋于壳聚糖（chitosan）、聚-N-异丙基丙烯酰胺（PNIPAAM）、丝素蛋白（silk fibroin）和纤维素纳米晶体（CNC）水凝胶中，并旋涂至纳米铂—石墨烯修饰电极上。传...