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Development of Nonspecific BRET-Based Biosensors to Monitor Plasma Membrane Inositol Lipids in Living Cells.

Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) 2019 Tóth JT, Gulyás G, Hunyady L, Várnai P

磷脂酰肌醇(phosphoinositides, PPIn)在多种细胞器中含量低、代谢周转快,且可随外界刺激快速变化,传统同位素标记、质谱、荧光标记脂质和抗体方法在亚细胞分辨、异构体区分或活细胞动态监测方面存在局限。本文建立一种基于生物发光共振能量转移(BRET)的非特异性磷脂酰肌醇脂质传感器体系。该体系将磷脂酰肌醇识别蛋白结构域(...

Aromatic amino acids and their relevance in the specificity of the PH domain.

Journal of molecular recognition : JMR 2017 Morales J, Sobol M, Rodriguez-Zapata LC, Hozak P 等 5 人

磷脂酰肌醇是细胞信号转导、分化、应激、转录和染色质重塑中的重要第二信使。磷脂酶C-δ1的Pleckstrin同源(PH)域可识别并结合PI(4,5)P2,因此常与荧光标签偶联后作为磷脂酰肌醇生物传感器。本研究通过定点突变改变PLCδ1 PH域的一级结构,以调节其对磷脂酰肌醇的特异性,获得K30A、W36F和W36Y三个突变体。K30...