背景：腺苷酸环化酶（AC）通路对肺血管舒张至关重要，并受低氧抑制。佛手柑内酯（FSK）变构结合 AC，刺激 ATP 催化生成 cAMP。AC6 是肺动脉主要 AC 亚型，选择性再激活 AC6 可恢复低氧下 AC 活性，但需阐明其 FSK 结合位点。方法：在常氧（21% O2）、低氧（10% O2）或 S-硝基半胱氨酸（CSNO）处理...
褪黑素是松果体分泌的吲哚胺类神经激素，其受体 MTNR1A 和 MTNR1B 属于 G 蛋白偶联受体（GPCR）家族，参与睡眠、昼夜节律和情绪调节，并参与抑制肿瘤生长，因此是失眠、昼夜节律睡眠障碍和癌症的重要分子靶点。酿酒酵母是检测人源 GPCR 激动剂活性的高通量宿主。作者此前建立了基于 GPCR 的酵母荧光生物传感器，采用高敏感...
来自海洋贻贝 Crenomytilus grayanus 的 GalNAc/Gal 特异性凝集素 CGL 具有抗癌活性，代表具有 β-三叶草折叠的新型凝集素家族。此前，CGL 与 Gb3、半乳糖和半乳糖胺复合物的晶体结构及突变研究揭示其含有三个糖结合位点。CGL 能识别乳腺癌细胞表面的 Gb3 并结合常与肿瘤转化相关的黏蛋白型糖蛋白...
单克隆抗体（mAb）表位的表征对治疗性抗体、诊断工具和疫苗开发具有重要意义，也可为病原体感染或疫苗接种后抗体应答的序列库分析提供功能信息。然而，表位映射策略的发展滞后于 mAb 的发现。作者开发了一种定点突变方法，并与生物层干涉（BLI）生物传感器联用，用于映射 mAb 表位。通过构建流感 A 病毒重组血凝素（HA）和神经氨酸酶（N...
磷脂酰肌醇是细胞信号转导、分化、应激、转录和染色质重塑中的重要第二信使。磷脂酶C-δ1的Pleckstrin同源（PH）域可识别并结合PI(4,5)P2，因此常与荧光标签偶联后作为磷脂酰肌醇生物传感器。本研究通过定点突变改变PLCδ1 PH域的一级结构，以调节其对磷脂酰肌醇的特异性，获得K30A、W36F和W36Y三个突变体。K30...
本研究以模拟生物嗅觉为出发点，探索一种昆虫气味结合蛋白（OBP）作为生物传感器识别元件的基本特性。作者对斜纹夜蛾 SlitOBP1 进行同源建模，并利用分子对接模拟其与 1,536,550 种化合物的结合模式，以评估其广谱配体识别能力。通过重组表达获得大量纯化 SlitOBP1，克服了天然传感材料获取困难。荧光结合实验表明，该蛋白对...
本文在大肠杆菌中过表达来源于 Cellulosimicrobium cellulans 内切-1,3-β-葡聚糖酶催化结构域 C 端的碳水化合物结合模块 13（CBM13，CBM-DK），并利用表面等离子共振（SPR）生物传感器和等温滴定量热（ITC）分析其与 β-葡聚糖、层流胶（laminarin）及层流寡糖（laminariol...
定点突变与固定化通常被视为改善蛋白质性能的两类独立技术，但已有研究表明，利用定点突变不仅可直接改善酶的性质，还可调控酶在支持物上的固定化方式，从而显著提升用于生物传感器或生物催化剂的固定化生物分子性能。常规固定化并非完全随机，蛋白质取向往往难以改变。早期研究主要利用定点突变控制酶在支持物上的取向，以促进氧化还原生物传感器中支持物与酶...
NahR 是萘降解途径中响应水杨酸的转录调控因子，是检测萘和水杨酸的微生物生物传感器核心元件。为最大化传感器灵敏度，作者通过定点突变 nahR 基因进行理性设计，在已知参与中心诱导剂识别和 C 端多聚化的第 169 位和第 248 位构建 8 个单突变体（N169A、N169C、N169K、N169S、R248H、R248M、R24...
本文报道了一种基于多生物介导剂的荧光生物传感器演示系统，用于快速筛查环境样品中的除草剂。系统以单细胞绿藻衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）为生物识别元件，利用光系统II（PSII）中D1蛋白QB位点与除草剂结合后抑制QA到QB电子传递的机制，通过叶绿素荧光诱导曲线（Kautsky曲线）参数（1−VJ）的变化进...
胞质谷胱甘肽转移酶（GSTs）是一类高容量配体结合蛋白，可识别多种疏水性化合物。本研究通过动力学抑制、定点突变和分子建模，考察非底物异生物（除草剂和杀虫剂）与玉米 GST I 的结合。结果表明，异生物结合于底物结合位点。基于分子对接分析，选择两个残基评估其对异生物结合的贡献；Gln53Ala 突变体对杀虫剂马拉硫磷的抑制效力较野生型...
海肾荧光素酶（RLUC）是基因表达检测和体内生物传感器应用中的多功能工具，但其催化机制尚未阐明。RLUC 与 α/β 水解酶家族相关，最近同源物为细菌脱卤酶，因此具有水解酶折叠的蛋白质如何作为脱羧加氧酶发挥作用成为关键问题。本研究以 coelenterazine 对 RLUC 同源模型和晶体结构进行分子对接，提出功能残基假说，并通过...