Enzyme and microbial technology
2011
定点突变与固定化通常被视为改善蛋白质性能的两类独立技术,但已有研究表明,利用定点突变不仅可直接改善酶的性质,还可调控酶在支持物上的固定化方式,从而显著提升用于生物传感器或生物催化剂的固定化生物分子性能。常规固定化并非完全随机,蛋白质取向往往难以改变。早期研究主要利用定点突变控制酶在支持物上的取向,以促进氧化还原生物传感器中支持物与酶...
Journal of nanobiotechnology
2011
Ulman A, Ioffe M, Patolsky F, Haas E 等 5 人
本文报道一种用于精确固定化生物分子并保留其天然功能的新方法,以腺苷酸激酶(AK)为模型系统。研究在金表面构建1,6-己二硫醇(HDT)自组装单分子层(SAM),并通过接触角、Elman试剂、石英晶体微天平(QCM)和X射线光电子能谱(XPS)表征。作者设计突变AK,将75位残基替换为半胱氨酸、77位半胱氨酸替换为丝氨酸,使蛋白通过自...
Applied and environmental microbiology
2010
Tolba M, Minikh O, Brovko LY, Evoy S 等 5 人
本研究建立了一种通过噬菌体展示技术在大肠杆菌噬菌体 T4 头部定向引入亲和标签的方法,用于生物传感器应用。将生物素羧基载体蛋白基因(bccp)或纤维素结合模块基因(cbm)与 T4 小外壳蛋白基因(soc)融合,使重组噬菌体头部表达相应配体。感染性分析表明,重组噬菌体保留裂解活性和宿主范围,但裂解量下降、潜伏期延长。进一步考察了重组...