Kinetic Analysis and Epitope Mapping of Monoclonal Antibodies to
鼠伤寒沙门氏菌是全球食源性疾病的主要病原之一,基于单克隆抗体的生物传感器和免疫分析被广泛用于其检测与分型。然而,由于缺乏抗体与鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白结合性质的系统信息,适合用于检测体系开发的抗体筛选较为困难。本研究采用表面等离子共振(SPR)生物传感器,比较一组抗鞭毛蛋白单克隆抗体与鞭毛蛋白的结合动力学及其相对结合位点。首先,通过固...
鼠伤寒沙门氏菌是全球食源性疾病的主要病原之一,基于单克隆抗体的生物传感器和免疫分析被广泛用于其检测与分型。然而,由于缺乏抗体与鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白结合性质的系统信息,适合用于检测体系开发的抗体筛选较为困难。本研究采用表面等离子共振(SPR)生物传感器,比较一组抗鞭毛蛋白单克隆抗体与鞭毛蛋白的结合动力学及其相对结合位点。首先,通过固...
单克隆抗体(mAb)表位的表征对治疗性抗体、诊断工具和疫苗开发具有重要意义,也可为病原体感染或疫苗接种后抗体应答的序列库分析提供功能信息。然而,表位映射策略的发展滞后于 mAb 的发现。作者开发了一种定点突变方法,并与生物层干涉(BLI)生物传感器联用,用于映射 mAb 表位。通过构建流感 A 病毒重组血凝素(HA)和神经氨酸酶(N...
本文介绍一种无标记细胞基生物传感器方法,用于研究生物分子与细胞表面受体之间的相互作用,从而在天然生物学背景下评估分子识别事件。由于分析物直接结合仍完整保留在细胞膜上的受体,实验可保留细胞表面微环境、糖基化、膜蛋白聚集等复杂性,获得完整结合动力学信息。方法基于 Attana 细胞生物传感器平台(石英晶体微天平,QCM),通过双通道流动...
表面等离子共振(SPR)长期用于药物候选分子的亲和力与动力学表征。随着治疗性单克隆抗体(mAbs)药物类别增长以及高通量无标记生物传感器出现,其应用已从单纯结合测量扩展到早期药物发现中的表位表征,包括 mAb 的表位分箱与映射。本文综述了表位表征在抗体药物发现早期的重要性,并提出成功发现先导化合物的策略:在克隆预筛选后对 mAbs ...
本文展示了提高 ProteOn XPR36 生物传感器通量的方法,使其能够同时表征多种多路复用格式,例如 36 个靶向同一抗原的不同单克隆抗体,并支持详细的表位分箱与表位映射研究。采用这些方法测得的动力学速率常数与 Biacore 2000 的结果高度相关;ProteOn 藻酸盐基 GLC 芯片获得的绝对参数值与 Biacore 平...