Cell reports
2018
Markwardt ML, Snell NE, Guo M, Wu Y 等 8 人
复杂细胞行为需要动态调控非肌球蛋白II（NMMII）调节轻链（RLC）磷酸化。本文报道一种基于同源转移荧光共振能量转移（FRET）的遗传编码生物传感器策略，用于在活细胞和生物体中追踪 RLC 磷酸化。荧光蛋白标记的 RLC 在去磷酸化构象中发生 FRET，因此可通过荧光偏振/各向异性成像识别并定量 RLC 磷酸化。该方法兼容多种荧光...
PloS one
2018
Vuong-Brender TTK, Boutillon A, Rodriguez D, Lavilley V 等 5 人
黏附连接（AJs）是维持组织完整性和细胞间黏附的关键结构。在形态发生过程中，连接蛋白与肌动球蛋白网络协同驱动细胞运动和形状变化，但连接如何在体内形态发生事件中在空间和时间上整合机械力仍不清楚，缺乏定量数据。为此，我们在秀丽隐杆线虫的 HMP-1/α-catenin 中插入基于荧光共振能量转移（FRET）的功能性力传感器。我们发现，施...
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
2018
Charmpilas N, Kounakis K, Tavernarakis N
线粒体是真核细胞主要的能量产生中心，并参与脂质代谢、钙缓冲和凋亡等关键过程，其功能障碍会破坏细胞稳态。线粒体自噬通过选择性隔离受损或功能异常的线粒体，将其转运至溶酶体降解，从而维持细胞功能并影响寿命。本文以秀丽隐杆线虫为模型，介绍在活体中定量监测线粒体自噬事件的实验方法。作者利用体壁肌细胞中表达的荧光报告系统，通过共聚焦或荧光显微镜...