磷酸酶和张力蛋白同源物诱导激酶1（PINK1）是一种线粒体丝氨酸/苏氨酸激酶，参与线粒体自噬、细胞死亡和细胞生物能量调节。健康线粒体中 PINK1 被切割降解，线粒体损伤后全长 PINK1 稳定、二聚并自磷酸化激活，进而磷酸化 Parkin 和泛素，标记受损线粒体。现有 PINK1 研究多依赖整体检测，只能提供活性快照，难以反映单细...
线粒体是有氧呼吸的主要场所，在维持细胞和机体生理功能中起关键作用。线粒体稳态、功能、健康及损伤均与影响人类健康和病理的系统效应相关。因此，线粒体在人体中充当天然生命生物传感器，以整体方式调控身体和心理健康状态。目前尚无已知疾病独立于线粒体健康受损而发生，无论是原发性线粒体功能障碍的原因，还是继发性线粒体损伤的目标。这使线粒体医学成为...
多能干细胞分化时会发生线粒体代谢转变，但机制不清。我们假设人诱导多能干细胞（hiPSC）向血管内皮细胞分化时，线粒体先经历线粒体自噬，再由新生线粒体生物发生补充，以适应分化细胞代谢需求。利用共聚焦显微镜对分化中的 hiPSC 进行活细胞成像，发现分化早期出现线粒体自噬高峰，随后线粒体生物发生增加，后者由 MitoTimer 评估。分...
背景：阿比特龙（abiraterone）和MDV3100是前列腺癌的有效抗癌药物，但其下游作用机制尚不明确。方法：将双荧光生物传感器质粒转染LNCaP细胞以测量线粒体自噬；提取LNCaP细胞DNA并进行定量实时PCR检测线粒体DNA拷贝数；采用JC-1染色检测线粒体膜电位；电子显微镜分析线粒体形态；Western blot检测线粒体...
受损线粒体可通过产生过量自由基等促凋亡介质加速细胞死亡，因此增加线粒体数量本应加重应激损伤。然而既往研究发现，肾小管诱导线粒体生物合成因子过氧化物酶体增殖物γ共激活因子1α（PGC1α）可增加线粒体质量并保护缺血和炎症性肾损伤。本研究进一步考察PGC1α依赖性肾保护是否延伸至顺铂毒性急性肾损伤。作者利用CRISPR构建PGC1α敲除...
受损线粒体参与神经病理过程，使线粒体自噬受到关注。本研究通过药物抑制原代小鼠小脑颗粒神经元（CGCs）线粒体呼吸链，探讨神经元线粒体自噬的触发因素。分别用鱼藤酮（Rot）、3-硝基丙酸（3-NP）、抗霉素A（AA）和氰化钾（KCN）抑制复合物I、II、III和IV，并依据细胞活力、突起损伤、质膜通透性和氧化磷酸化确定产生缓慢细胞死亡...
线粒体是真核细胞主要的能量产生中心，并参与脂质代谢、钙缓冲和凋亡等关键过程，其功能障碍会破坏细胞稳态。线粒体自噬通过选择性隔离受损或功能异常的线粒体，将其转运至溶酶体降解，从而维持细胞功能并影响寿命。本文以秀丽隐杆线虫为模型，介绍在活体中定量监测线粒体自噬事件的实验方法。作者利用体壁肌细胞中表达的荧光报告系统，通过共聚焦或荧光显微镜...
线粒体自噬是一种靶向清除受损线粒体的细胞器特异性自噬形式，可维持细胞稳态并防止活性氧积累；帕金森病相关蛋白 PINK1 和 Parkin 在线粒体自噬启动中起关键作用。本文介绍一种基于图像的高通量方法，用于定量检测线粒体 Parkin 易位，即线粒体自噬启动的关键机制事件。作者利用稳定表达 mCherry-Parkin 融合蛋白的人...
线粒体功能障碍与多种人类疾病及正常衰老相关，其稳态依赖线粒体自噬（mitophagy）介导的受损线粒体向溶酶体转运与降解。线粒体自噬依赖巨自噬（macroautophagy），但本身是选择性过程，可在特定条件下与巨自噬解耦，因此需同时并分别评估两者。作者开发了一种基于流式细胞术（FCM）的高通量定量方法，利用单一荧光蛋白生物传感器 ...
自噬在多种条件下参与细胞组分周转，既是稳态维持机制，也是质量控制机制，可选择性降解包括细胞器在内的细胞物质。若受损或多余线粒体未被清除，可能威胁细胞稳态与存活。在酿酒酵母中，营养缺乏（如氮饥饿）或损伤可诱导线粒体选择性自噬，即线粒体自噬。本文描述一种简单荧光显微镜方法，用于评估酵母细胞中的自噬，并重点展示监测线粒体自噬。该方法使用双...