放线菌是重要的次级代谢产物生产菌，在抗生素等工业发酵中具有巨大应用潜力。然而，工业放线菌菌株工程长期受限于低效、费力的平板/摇瓶筛选流程，亟需产物驱动的高通量筛选方法。本研究将全细胞生物传感器与微流控平台相结合，建立了用于筛选放线菌的全细胞生物传感器-生产者共培养微流控平台（WELCOME）。在 WELCOME 中，作者开发了基于 ...
克拉霉素（clarithromycin, CLA）是天然大环内酯红霉素（erythromycin, ErA）的改进半合成类似物。C6羟基上引入甲基使分子酸稳定性提高，成为临床有用抗生素。本文表明，生物传感器蛋白 MphR 的效应物特异性可通过进化被改造为选择性识别 CLA，从而在活细胞内报告该分子的生成。此外，进化变体的晶体结构揭示...
开发并优化小分子生物传感器是合成生物学的核心目标。本文通过引入额外细胞组分，防止目标分子从细胞中扩散，从而提高生物传感器灵敏度。作者证明，利用磷酸化将红霉素A（erythromycin A, EryA）截留在大肠杆菌内，可使其 MphR 生物传感器的灵敏度提高约10倍。结合此前对 MphR 的工程改造，优化后的传感器可检测低至13 ...
大环内酯是一类具有广泛强效生物活性的天然产物，由 I 型聚酮合酶（PKS）及相关酶机器生物合成。药物发现、药物生产和探针开发迫切需要获取大环内酯及其非天然衍生物。通常，在不同微生物宿主中工程化大环内酯及其类似物生物合成的努力，受限于大环内酯生物合成途径的复杂性，以及我们理性重编程 I 型 PKS 和 PKS 后修饰机器的能力有限。基...
大环内酯生物传感器蛋白 MphR(A) 是代谢物感应与基因表达调控的关键蛋白。MphR(A) 结合红霉素（erythromycin, Ery）后释放基因操纵子，激活 mphA 基因表达并启动红霉素耐药。V66L 和 V126L 突变可能破坏 Ery 与 MphR(A) 的结合。本研究采用分子动力学模拟，比较野生型 MphR(A) 与...
调控蛋白 MphR(A) 近期在合成生物学中用于代谢物传感和外源基因表达控制。该蛋白通过结合位于 mphA 起始密码子上游的 35 bp DNA 操纵序列，负向调控大环内酯 2′-磷酸转移酶 I 抗性基因 mphA 的表达，并在红霉素存在下解除抑制。本文报道了无红霉素结合态 MphR(A) 及红霉素结合态 MphR(A) 的精细晶体...