流感疫情每年造成数百万重症和数十万死亡，现有疫苗因病毒频繁变异而保护有限，亟需快速监测流感病毒感染的实验方法。此前虽已构建携带荧光蛋白或小型荧光素酶的复制型报告病毒，但每种病毒株均需反向遗传改造，费时且不便。本研究利用流感A病毒核蛋白（NP）特异性纳米抗体，构建了一种NP依赖的报告基因转录激活模块。该模块将Gal4 DNA结合域（D...
RHO GTP酶是分子开关，其GTP结合态激活涉及肌动蛋白细胞骨架动态的关键信号通路。作者此前从合成噬菌体展示文库中筛选到纳米抗体RH12，可结合RHOA的GTP结合活性构象，但作为细胞内抗体表达时会阻断RHO信号，导致肌动蛋白纤维丢失并影响细胞形态与存活。为构建RHOA-GTP激活的细胞内生物传感器，本研究对同一噬菌体纳米抗体文库...
化学诱导二聚化（CID）系统仅在存在小分子配体时使两个蛋白二聚化，为小分子传感与调控提供了灵活工具。然而，目前可用的 CID 系统很少，且针对任意给定配体构建具有所需敏感性和特异性的 CID 系统仍是未解决问题。本文提出组合结合剂辅助 CID 筛选（COMBINES-CID）方法，可广泛适用于不同配体。该方法先筛选能结合目标配体的锚...
本文报道了一种基于融合蛋白的均相免疫检测系统，用于小分子抗原的信号开启型检测。该系统以抗体可变区（VH/VL）作为识别元件，并分别连接界面突变β-葡萄糖醛酸酶（GUSm）作为报告酶；小分子抗原结合后诱导可变区二聚化，使原本无活性的GUSm二聚体进一步组装为活性四聚体，从而催化荧光底物产生荧光信号。此前GUSm因热稳定性差及可能由自发...
全细胞生物传感器有望成为低成本、易使用的即时检测（POC）诊断工具，但难以检测不能跨膜扩散的蛋白分析物。本文开发了一种基于大肠杆菌全细胞表面展示纳米抗体的细胞凝集生物传感平台，用于特异性识别目标蛋白。概念验证中，展示抗绿色荧光蛋白（GFP）纳米抗体的大肠杆菌与串联二聚体GFP（tdGFP）结合后发生交联凝集，可在纳摩尔浓度下检测模型...