Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2020
Yamamoto K, Nogimori Y, Imamura H, Ando J
血管内皮细胞(ECs)能感知血流剪切应力,但其机械转导机制仍不清楚。作者此前证明线粒体在剪切应力嘌呤能信号中起直接作用:剪切增加线粒体三磷酸腺苷(ATP)产生,触发 ATP 释放和钙信号。本研究显示,剪切应力可快速降低质膜胆固醇,从而激活线粒体 ATP 产生。利用 domain 4(D4)突变体胆固醇生物传感器成像发现,培养内皮细胞...
Methods in cell biology
2020
Morciano G, Imamura H, Patergnani S, Pedriali G 等 6 人
ATP是细胞能量代谢的核心代谢物,也是细胞内信号分子,其浓度变化与细胞功能、活力和命运密切相关。本文介绍两种基于遗传编码生物传感器的活细胞ATP检测方法:萤火虫荧光素酶生物发光法和ATeam FRET荧光生物传感器。前者利用线粒体靶向萤火虫荧光素酶(mtLuc)在细胞内催化荧光素(luciferin)、ATP和O2反应,生成激发态o...
FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology
2020
Kioka H, Kato H, Fujita T, Asano Y 等 12 人
多数真核细胞通过氧化磷酸化系统(OXPHOS)产生三磷酸腺苷(ATP)以支持细胞活动。我们在培养细胞实验中鉴定缺氧诱导蛋白 G0/G1 转换基因 2(G0s2)为 OXPHOS 的正向调节因子,并证明 G0s2 可保护培养心肌细胞免受缺氧损伤。本研究通过构建斑马鱼 g0s2 功能缺失与功能获得模型,考察 G0s2 在体内对缺氧的保护...
American journal of physiology. Heart and circulatory physiology
2018
Yamamoto K, Imamura H, Ando J
血管内皮细胞(ECs)可感知血流产生的剪切应力并将其转化为细胞内生化信号,其中钙离子信号在机械转导中起关键作用。已知剪切应力可促使内皮细胞在小窝(caveolae)处释放三磷酸腺苷(ATP),释放的 ATP 激活 P2 嘌呤能受体,引起细胞外钙离子内流;但剪切应力如何诱发 ATP 释放仍不清楚。本研究证明线粒体在该过程中发挥关键作用...
Scientific reports
2016
Yoshida T, Kakizuka A, Imamura H
腺苷三磷酸(ATP)水平可反映细胞基本健康状况,但活细胞内ATP的精确测量仍缺乏合适方法。本文开发了一种新型BRET(生物发光共振能量转移)ATP生物传感器BTeam。BTeam由黄色荧光蛋白mVenus、枯草芽孢杆菌FoF1-ATP合酶ε亚基的ATP结合域以及不消耗ATP的荧光素酶NLuc组成。加入NLuc底物furimazine...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2015
Hayashi T, Asano Y, Shintani Y, Aoyama H 等 25 人
细胞色素c氧化酶(CcO)是线粒体氧化磷酸化中唯一利用氧气建立质子梯度的酶。尽管低氧可增强CcO活性,其调控机制长期不明。作者在大鼠新生心肌细胞中筛选低氧诱导基因,发现低氧诱导结构域家族成员1A(Higd1a)是CcO的正调控因子。重组Higd1a可直接整合入高纯度牛心CcO复合物,并将其活性提高约2倍。共振拉曼光谱显示,Higd1...
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America
2014
Kioka H, Kato H, Fujikawa M, Tsukamoto O 等 21 人
氧化磷酸化(OXPHOS)系统产生呼吸细胞中大部分三磷酸腺苷(ATP)。缺氧等导致ATP耗竭的刺激会触发促进ATP生成的适应性反应,但缺氧早期OXPHOS如何被调控仍不清楚。本研究通过选择性测量线粒体基质内ATP水平,鉴定缺氧诱导蛋白G0/G1转换基因2(G0s2)为OXPHOS的正调控因子。作者利用线粒体靶向的FRET型ATP生物...