Direct measurement of deubiquitinating enzyme activity in intact cells using a protease-resistant, cell-permeable, peptide-based reporter.

Biochemical engineering journal 2019 Safa N, Pettigrew JH, Gauthier TJ, Melvin AT

去泛素化酶（DUBs）通过移除靶向蛋白上的多聚泛素链调控蛋白降解，现有DUB活性定量方法多限于酶或细胞裂解液体系，无法在完整细胞中直接测量。本研究开发了一种可穿膜、抗蛋白酶、荧光型且DUB特异性的肽基生物传感器。该传感器N端为β-发夹序列，兼具保护肽（protectide）和细胞穿透肽（CPP）功能，可增强胞内稳定性并促进完整细胞摄...

荧光生物传感器 去泛素化酶肽基生物传感器细胞穿透肽荧光检测

Population-based analysis of cell-penetrating peptide uptake using a microfluidic droplet trapping array.

Analytical and bioanalytical chemistry 2019 Safa N, Vaithiyanathan M, Sombolestani S, Charles S 等 5 人

细胞穿透肽（CPPs）作为将报告分子和药物递送至完整细胞的方法受到广泛关注。尽管已有大量研究鉴定新的CPP序列，但其在单细胞水平的摄取效率仍知之甚少。本研究利用液滴微流控捕获阵列对单细胞完整细胞群体中的CPP摄取进行表征。该微流控器件可在787个顶部捕获微孔阵列中便捷、快速地分离并分析单细胞荧光，液滴捕获效率>99%。在HeLa细胞...

微流控生物传感器 液滴捕获阵列细胞穿透肽单细胞分析荧光成像