表面等离子共振（SPR）是一种研究配体与分析物相互作用的强有力技术，但离子强度、传感表面性质和注射方法等实验参数可能影响结合与亲和力测定。对于常带正电荷的核酸结合配体，负电荷传感表面可能引起显著非特异相互作用和再生困难。本文以卟啉类G-四链体（G4）配体为模型，系统考察缓冲液离子强度、SPR生物传感器表面类型以及注射方法对卟啉识别G...
新型治疗性抗体常具有多价或多特异性结合位点，其结合动力学受亲和力与亲合力共同影响，传统生物传感器表面随机固定抗原难以区分单臂与双臂结合。本文提出一种形似弹弓的 DNA 纳米结构，由 90 个核苷酸组成，包含 30 bp 双链刚性柄和单链弹弓臂；通过杂交 20 nt 互补间隔链，可在约 6.1 nm 的固定距离上装载两个相同或不同抗原...
生物分子相互作用通常通过群体测量进行分析，并假定其以单一结合方式进行；然而，这类相互作用可能通过多种结合模式发生。本研究以DNA杂交作为生物分子相互作用的多动态模型，分别采用全内反射荧光显微镜（TIRFM）进行单分子观察，以及石英晶体微天平（QCM）生物传感器进行群体测量，对DNA杂交动力学进行分析。作者观察了8 bp和12 bp随...
本文在18°C下利用带耗散监测的石英晶体微天平（QCM-D），研究了金表面修饰互补20碱基捕获探针单链DNA（ssDNA）与20碱基目标ssDNA的杂交和去杂交过程。所选20碱基对序列的熔解温度约为64°C。结果表明，在实验条件下DNA杂交不可逆，因此杂交/去杂交过程不能用Langmuir吸附模型描述；但用纯水彻底冲洗传感器表面可实...
定量分子结合亲和力是药物研发和生命科学研究的重要组成。本章概述表面等离子共振（SPR）光谱法监测蛋白-蛋白相互作用的实用方法，重点介绍基本实验设计，包括配体固定、分析物注射、表面再生和数据评价，并简要总结 SPR 表位分箱实验。SPR 生物传感器可无标记实时监测分子相互作用：一个结合伙伴作为配体固定在传感芯片表面，另一个作为分析物通...
本文介绍一种无标记细胞基生物传感器方法，用于研究生物分子与细胞表面受体之间的相互作用，从而在天然生物学背景下评估分子识别事件。由于分析物直接结合仍完整保留在细胞膜上的受体，实验可保留细胞表面微环境、糖基化、膜蛋白聚集等复杂性，获得完整结合动力学信息。方法基于 Attana 细胞生物传感器平台（石英晶体微天平，QCM），通过双通道流动...
结构-动力学关系分析和主导相互作用识别应基于内在速率常数，而非同时包含结合偶联反应的观测动力学常数。作者采用新型表面等离子共振（SPR）生物传感器方法，结合结合偶联 pH 依赖效应的化学动力学分析，测定了磺酰胺抑制剂与药理学相关碳酸酐酶（CA）亚型的内在速率常数。观测结合速率（ka_obs）随 pH 变化，并与去质子化抑制剂分数及质...