International journal of molecular sciences
2021
Park JM, Kim MY, Jose J, Park M
本研究开发了一种用于表面等离子共振(SPR)生物传感器的可再生免疫亲和层,该层由共价固定的定向抗体组成。为实现抗体定向,采用自展示Z结构域的大肠杆菌细胞及其外膜(OM),并使用双琥珀酰亚胺交联剂实现抗体的共价结合。制备可再生免疫亲和层时,先将捕获抗体结合到自展示的Z结构域上,再用交联剂处理以化学固定。研究评估了双琥珀酰亚胺戊二酸酯(...
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
2018
Park M, Pyun JC, Jose J
自展示(autodisplay)是利用革兰氏阴性菌外膜(OM)自转运蛋白分泌途径,将重组蛋白定向展示于细胞表面的表达系统。近年来,IgG结合Z结构域和生物素结合链霉亲和素等亲和蛋白被自展示于大肠杆菌(E. coli)外膜,用于分析与生物医学应用。本文综述了该系统的分泌机制,以及亲和蛋白在OM上的定向与密度控制。通过去垢剂分离纯化自展...
Enzyme and microbial technology
2017
Chang SY, Bong JH, Yoo G, Lee M 等 7 人
自展示技术可将目标蛋白高效表达于大肠杆菌外膜。本研究分别制备表达两种自展示蛋白的大肠杆菌外膜组分,并按设定比例混合,以验证在同一外膜层中控制两种自展示蛋白比例的可行性。第一模型为Z-domain与streptavidin,二者分别结合IgG Fc区和生物素,具有相互独立的结合活性;作者将混合外膜层固定于96孔微孔板和SPR生物传感器...
Biosensors & bioelectronics
2010
Jose J, Park M, Pyun JC
本研究利用Autodisplay技术将蛋白A的Z-domain作为重组融合蛋白表达于大肠杆菌(Escherichia coli)外膜上,并将自展示Z-domain的大肠杆菌外膜层作为高灵敏度分子识别层构建SPR生物传感器。作者通过不同疏水性的受控表面验证了外膜层的形成,并利用辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体作为模型分析物评估Z-do...