过去几十年，Fc片段偶联蛋白如Protein A广泛用于抗体纯化、抗体定点固定和生物传感平台。本研究基于前期工作，设计并筛选了一种亲和DNA功能配体（A-DNAFL），实验验证其对小鼠IgG抗体的结合亲和力（KD=6.59×10^-8），结合性能与Protein A相当。系统评估不同pH和离子强度下结合效率，最优抗体固定条件为生理p...
本研究通过优化表面等离子共振（SPR）生物传感器设计，增强了对志贺毒素（Stx）的检测。志贺毒素是志贺氏菌引起血性腹泻的关键毒力因子。作者比较了不同抗体固定策略，证明蛋白G介导的定向固定显著优于传统共价固定。使用11-巯基十一烷酸修饰芯片的非定向共价固定法性能中等，解离常数KD为37 nM，检出限LOD为28 ng/mL。相比之下，...
真菌来源的FAD依赖葡萄糖1-脱氢酶（FAD-GDH）的发现与工程化对葡萄糖生物传感器的制备和性能提升具有重要意义。本研究从黑曲霉An76中鉴定到一个与其他曲霉属FAD-GDH系统发育关系较远的新FAD-GDH基因，并在毕赤酵母中异源表达野生型GDH及其C端经天然连接子（NL）融合碳水化合物结合模块2（CBM2）的融合酶GDH-NL...
本文报道一种无需化学修饰即可在生物传感器表面实现人 IgG1 Fc 融合凝集素聚集与定向固定的新支架。作者将显示金黄色葡萄球菌蛋白 A 来源串联 IgG Fc 结合 Z 域（ZZ-BNC）的生物纳米囊固定于 QCM 金芯片，经 Block Ace 封闭后，使 E-selectin-Fc 通过 Fc 区与 ZZ-BNC 结合，糖结合位...
生物传感器芯片上生物传感分子的取向与密度需精确控制，以提高灵敏度和配体结合能力。作者此前开发了约30 nm生物纳米囊泡ZZ-BNC，其由乙肝病毒包膜L蛋白与蛋白A来源IgG Fc结合Z结构域串联体（ZZ-L蛋白）融合组成，可作为稳健纳米颗粒支架，增强IgG及Fc融合传感分子的敏感性和配体结合能力。然而，ZZ-BNC刚性颗粒结构使ZZ...
自展示（autodisplay）是利用革兰氏阴性菌外膜（OM）自转运蛋白分泌途径，将重组蛋白定向展示于细胞表面的表达系统。近年来，IgG结合Z结构域和生物素结合链霉亲和素等亲和蛋白被自展示于大肠杆菌（E. coli）外膜，用于分析与生物医学应用。本文综述了该系统的分泌机制，以及亲和蛋白在OM上的定向与密度控制。通过去垢剂分离纯化自展...
癌胚抗原（CEA，又称CEACAM5）参与肿瘤侵袭与转移中的黏附过程，是辅助诊断肿瘤复发和转移的常用肿瘤标志物。针对CEA的抗体已用于肿瘤切除后的检测与诊断。来自单峰驼和羊驼的抗CEA单域抗体（sdAb）对肿瘤细胞具有高特异性，但将其偶联到传感器表面时未设计定向固定，导致活性与检测限存在提升空间。本研究在CEA sdAb的C端引入两...
嗅觉结合蛋白（OBP）是存在于嗅觉系统中的小分子可溶性蛋白，能够结合多种气味分子。多晶金刚石表面微悬臂梁具有优异的机械性能，是极具前景的化学换能器。本文研究了将猪 OBP 化学接枝到多晶金刚石表面的两种方法，用于生物传感器开发。第一种方法通过氨基己酸/己酸共价接枝及 EDC/NHS 偶联固定野生型 OBP，使蛋白在表面呈随机取向；第...
本文首次表明，使用三(2-羧乙基)膦（TCEP）还原抗体所得的半抗体片段，在剪切模式谐振质量传感器上产生的响应大于物理吸附全抗体或经蛋白G固定的全抗体。通过抗原结合响应证明还原抗体保留了抗原结合区。还原过程暴露抗体中的天然硫醇基团，使其能够以适合抗原结合的正确取向直接化学吸附在金涂层传感器表面。在石英晶体微天平（QCM）上比较使用T...
本文报道了一种化学酶法合成链端功能化含唾液酸乳糖糖聚合物并将其定向固定用于糖阵列和表面等离子共振（SPR）糖生物传感器的方法。首先通过氰氧基介导自由基聚合制备含乳糖糖聚合物，再经α2,3-和α2,6-唾液酸转移酶催化CMP-Neu5Ac分别进行酶促唾液酸化，得到O-氰酸酯链端功能化的α2,3-和α2,6-唾液酸乳糖糖聚合物。1H N...
临床免疫检测常具有合适灵敏度，但部分方法特异性不足，或反之。为在提高特异性与降低灵敏度之间取得折中，作者设计了采用定制嵌合受体和安培检测的间接免疫生物传感器，用于检测样品中特异性抗克氏锥虫免疫球蛋白G（IgG）。重组嵌合蛋白被设计为有利于定向共价固定，使其表位充分暴露、高效捕获分析物，并耐受强化学处理以实现传感器复用。随后结合辣根过...
本文基于成像椭偏术开发了一种用于薄膜与表面表征的成像椭偏生物传感器。研究采用蛋白A将人免疫球蛋白G（IgG）定向固定于硅表面，用于成像椭偏免疫分析。结果表明，经蛋白A固定于硅表面的人IgG比直接物理吸附于疏水表面的人IgG能结合更多多克隆抗IgG抗体，说明蛋白A可使IgG分子以高度取向方式固定，并较好保持其天然构象。进一步考察了蛋白...
蛋白质在固体界面的固定是生物传感、纯化、分离和去污等应用的关键。虽然固定可提高蛋白长期和操作稳定性，但常导致固定酶催化活性显著损失。共价固定利用氨基酸侧链反应基团，但酶表面溶剂暴露侧链分布常使蛋白通过侧链连接固定时呈现多种取向，不同固定机制和取向可能限制活性位点的可及性。本研究描述了一种将酶定向固定到表面等离子共振传感器表面的设计与...