Proteome-wide tagging with an H
过氧化氢（H2O2）的感知与信号转导依赖于特定蛋白半胱氨酸的可逆氧化，从而动态调控蛋白功能。为在单个蛋白和蛋白复合物尺度上鉴定细胞内源性 H2O2 生成“热点”，作者构建了酿酒酵母全蛋白组融合文库：将 H2O2 荧光生物传感器 HyPer7 融合到所有蛋白编码开放阅读框（ORF）的 C 端，并同时构建氧化不敏感突变体 SypHer7...
A Label-Free, Mix-and-Detect ssDNA-Binding Assay Based on Cationic Conjugated Polymers.
准确、简便、高效测定单链 DNA（ssDNA）浓度对 DNA 吸附、生物传感器设计和疾病诊断等分析应用很重要，但仍具挑战。本文研究基于阳离子共轭聚合物（CCP）的 ssDNA 检测方法，利用 CCP 结合 ssDNA 后明显荧光变化。聚[3-(3′-N,N,N-三乙氨基-1′-丙氧基)-4-甲基-2,5-噻吩盐酸盐]（PMNT）对 ...
A Ratiometric Fluorescent Biosensor Reveals Dynamic Regulation of Long-Chain Fatty Acyl-CoA Esters Metabolism.
尽管长链脂肪酸酰基辅酶A酯（LCACoAs）的生物学影响日益受到关注，但由于缺乏在活细胞中检测 LCACoAs 的方法，对其亚细胞分布和调控功能的认识仍然有限。本文报道了一种基因编码荧光传感器的开发，可实现活细胞及亚细胞区室中 LCACoAs 的比率定量。作者将大肠杆菌转录因子 FadR 与环状置换黄色荧光蛋白 cpYFP 融合，构...
Ratiometric analyses at critical temperatures can magnify the signal intensity of FRET-based sugar sensors with periplasmic binding proteins.
荧光共振能量转移（FRET）型传感器通过配体结合改变两个荧光蛋白之间的距离和取向，将识别事件转换为荧光光谱变化。本研究报道，将分析温度提高到通常高于50°C的临界温度，可显著提高以细菌周质结合蛋白（PBP）为识别元件的FRET糖类传感器信号强度。其机制是临界温度下背景信号突然降低，而在存在配体时最大FRET比率得以恢复。以麦芽糖结合...