Proteome-wide tagging with an H
过氧化氢(H2O2)的感知与信号转导依赖于特定蛋白半胱氨酸的可逆氧化,从而动态调控蛋白功能。为在单个蛋白和蛋白复合物尺度上鉴定细胞内源性 H2O2 生成“热点”,作者构建了酿酒酵母全蛋白组融合文库:将 H2O2 荧光生物传感器 HyPer7 融合到所有蛋白编码开放阅读框(ORF)的 C 端,并同时构建氧化不敏感突变体 SypHer7...
过氧化氢(H2O2)的感知与信号转导依赖于特定蛋白半胱氨酸的可逆氧化,从而动态调控蛋白功能。为在单个蛋白和蛋白复合物尺度上鉴定细胞内源性 H2O2 生成“热点”,作者构建了酿酒酵母全蛋白组融合文库:将 H2O2 荧光生物传感器 HyPer7 融合到所有蛋白编码开放阅读框(ORF)的 C 端,并同时构建氧化不敏感突变体 SypHer7...
胞内过氧化氢(H2O2)水平可在低生理浓度、信号浓度和毒性阈值之间波动。近几十年来,基于荧光蛋白的报告子被用于测量胞内 H2O2,其中氧化敏感绿色荧光蛋白(roGFP)与过氧化物酶融合的生物传感器最为敏感。作者此前在裂殖酵母中证明胞外至胞内过氧化物梯度约为300:1,生理 H2O2 处于低纳摩尔范围。本研究将高灵敏探针 roGFP2...
急性髓系白血病(AML)细胞中氧化还原代谢重编程对肿瘤发展有深远影响,但氧化还原平衡的细胞异质性如何影响白血病发生仍不清楚。为在体内精确表征氧化还原代谢的动态变化,我们开发了一种明亮的基因编码 H2O2 生物传感器 HyPerion,并在转基因传感器小鼠中原位追踪白血病细胞的氧化还原状态。低 H2O2(HyPerion-low)AM...
为减少生物传感器研究中的动物使用,本文提出将Franz扩散池用于体外生物传感器开发与评价。该装置可安装电极,使传感器在贴近皮肤的环境中表征。作者以辣根过氧化物酶(HRP)/单壁碳纳米管(SWCNT)修饰织物构建过氧化氢(H2O2)电化学生物传感器,其检出限为0.3 μM,灵敏度为184 μA mM−1 cm−2。在Franz扩散池中...
本研究以固定化来自 Pseudomonas putida MET94 的染料脱色过氧化物酶(PpDyP)及其三个定向进化(DE)变体为对象,旨在开发用于过氧化氢(H2O2)检测的生物传感器。通过共振拉曼(RR)和表面增强共振拉曼(SERR)光谱考察酶在溶液及固定化状态下的结构性质,并通过电化学方法分析其电催化性能。野生型(wt)和 ...
近年来,碳水化合物聚合物基复合材料因可增强酶或模拟酶的催化性能而在生物分析化学中受到关注。本文报道了一种基于血红素负载还原氧化石墨烯-纤维素微纤复合材料(hemin/RGO-CMF)的新型过氧化氢(H2O2)生物传感器。RGO-CMF复合材料通过维生素C辅助还原氧化石墨烯-纤维素微纤(GO-CMF)复合物制备,并采用多种物理化学方法...
本研究基于水溶性聚苯胺复合物和水溶性硅前驱体制备了具有可控溶胶-凝胶过程的电活性杂化凝胶。以β-环糊精接枝壳聚糖(CSCD)为模板,通过原位聚合设计了一条合成水溶性聚苯胺复合物(PA@CSCD)的新路线。随后将PA@CSCD复合物与四[2-羟乙基]正硅酸酯(THEOS)混合,制备出无明显收缩的杂化二氧化硅凝胶。动态流变测量表明,PA...
采用一步尿素法制备羧甲基壳聚糖(CMC)与二维 ZnAl 层状双氢氧化物(LDH)复合材料(LDH-CMC),并通过 XRD、FT-IR、UV-vis DRS、SEM、BJH/BET、TG-DTG、pHzpc、循环伏安和电化学阻抗谱进行表征。CMC 的引入可改变复合材料的孔结构和表面化学性质,同时保持二维层状结构;适量 CMC 能增...
本文报道了一种在硫醇修饰金表面上构建交联辣根过氧化物酶/碳纳米管(HRP/CNT)三维网络的新方法,以实现酶单元与电极之间有效电连接。通过循环伏安法和安培法表征,证实 HRP 氧化还原活性中心与金表面之间建立了直接电子转移。电化学测量表明固定化 HRP 具有高生物活性和稳定性,HRP 氧化还原中心在约 -0.355 V 和 -0.2...
过氧化氢(H2O2)是体内最稳定且丰富的活性氧物种,与感染、炎症等病理过程相关,也可作为酶联检测中疾病生物标志物检测的中间产物。传统光学 H2O2 检测多依赖有机染料,但其在环境条件下稳定性差。本文理性设计了基于抗氧化氧化铈(CeO2)纳米颗粒的仿生人工酶,并通过 Eu3+ 掺杂使其具有发光特性。作者系统调控粒径从 4 到 16 n...
本文对一种已报道的双安培 H2O2 生物传感器进行系统表征,该传感器由 H2O2 检测(空白)电极和含过氧化氢酶的降解电极组成。体外研究表明,传感器对 H2O2 具有良好灵敏性,并对主要干扰物抗坏血酸具有选择性。离体实验模拟生理条件,将传感器暴露于脑组织匀浆中,空白电极和催化酶电极在 7 天内均保持可靠的灵敏性与选择性;在离体小鼠脑...
上皮损伤会迅速招募抗菌白细胞到伤口部位。在斑马鱼幼鱼中,伤口边缘上皮 NADPH 氧化酶 Duox 的激活是这一早期反应所必需的。损伤前白细胞位于血管区域,距伤口约 100–300 μm,而 Duox 如何向白细胞建立长程信号仍不清楚。作者假设 Duox 产生的细胞外过氧化氢(H2O2)可经组织扩散,直接调节这些细胞的趋化信号;但在...
本文通过叠氮-炔环加成反应制备了新型二茂铁功能化羟丙基纤维素(HPC-Fc),并对其结构进行了表征。HPC-Fc 表现出优异的可逆氧化还原活性,能够在酶与电极之间建立高效的电子转移通道。将 HPC-Fc 与辣根过氧化物酶(HRP)共同涂覆于铂化碳电极表面,制备出用于检测过氧化氢(H2O2)的安培型生物传感器。在 100 mM 磷酸盐...
本文报道了一种高灵敏、稳定的安培型辣根过氧化物酶(HRP)生物传感器。该传感器通过在三维多孔碳化鸡卵壳膜(CESM)表面电沉积金纳米颗粒(AuNPs),并将 HRP 固定于 AuNPs-CESM 修饰的玻璃碳电极(GCE)上构建。CESM 的三维多孔碳结构与均匀分布的 AuNPs 协同作用,显著改善酶电极的电化学氧化还原行为。与裸 ...
本研究将枯草芽孢杆菌WD23的CotA漆酶基因克隆至毕赤酵母pPICZαB载体,在AOX1启动子和α-factor分泌信号驱动下实现分泌表达,培养上清酶活达891.2 U/L,并经离子交换与凝胶过滤纯化至均一。重组CotA漆酶对ABTS、SGZ和2,6-DMP氧化的最适pH分别为4.6、6.6和6.8,以SGZ为底物时最适温度为80...
本文提出一种简单新颖的电化学过氧化氢生物传感器,采用毕赤酵母来源过氧化氢酶(CATpp)作为生物电催化剂。该酶通过 EDC–NHS 偶联试剂固定于金纳米颗粒纳米管(AuNPNTs)与聚噻吩(PTh)复合材料上。作者用超声辐照法合成金纳米颗粒(AuNPs),并经牺牲模板法获得管状 AuNPNTs。AuNPNTs 通过 S–Au 化学吸...
本文报道了一种由碳纳米点(CNDs)与壳聚糖(chitosan)构成的新型复合膜,并将其作为固定血红素蛋白血红蛋白(Hb)的基质,用于直接电化学和生物电催化研究。将Hb-CNDs-壳聚糖复合膜滴涂于玻碳电极(GC)表面,制备得到修饰电极。光谱与电化学结果表明,复合膜中的Hb基本保持天然结构,而膜中的CNDs可显著促进Hb与GC电极之...
本文通过以亚甲基蓝(MB)、五氧化二钒(V2O5)和碘化钠(NaI)为起始原料的简单水热法,制备了 MB 嵌入 V2O5 的层状纳米复合材料。X 射线衍射(XRD)证实 MB 成功嵌入 V2O5 层间,使 d001 间距由 0.44 nm 增至 2.0 nm;扫描电镜(SEM)、红外光谱(IR)、热重分析(TGA)、紫外光谱(UV)...
本文报道了将血红蛋白(Hb)固定于羧基功能化多壁碳纳米管(FMWCNTs)与金纳米颗粒(AuNPs)纳米复合修饰的玻碳电极上,实现Hb的直接电子转移。采用紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)、透射电子显微镜(TEM)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)对AuNPs和FMWCNTs进行表征。循环伏安法显示修饰电极在0.05 V/s下具有一对...
本文用一步水热法制备核壳结构 Ag@C 纳米复合材料,用于蛋白质固定与生物传感。将辣根过氧化物酶(HRP)固定于 Ag@C 修饰的氧化铟锡(ITO)电极,研究其直接电化学行为及 H2O2 传感应用。电化学和紫外-可见光谱表明,Ag@C 是 HRP 的良好固定基质,包埋 HRP 保持生物活性。HRP–Ag@C/ITO 电极上 HRP ...