Definition of phosphoinositide distribution in the nanoscale.
磷脂酰肌醇(PIs)的新功能不断被揭示,研究膜区域尺度从微米级(如细胞器整体表面)缩小到纳米级(如细胞器亚区)。同时,低丰度PI如PI(3,4)P2和PI(3,5)P2的功能受到关注。随着进展,需要更精细准确的PI分布信息。多数研究使用利用PI结合结构域的荧光生物传感器和/或抗PI抗体免疫标记,但两种方法均存在已知局限。本文考察近期...
磷脂酰肌醇(PIs)的新功能不断被揭示,研究膜区域尺度从微米级(如细胞器整体表面)缩小到纳米级(如细胞器亚区)。同时,低丰度PI如PI(3,4)P2和PI(3,5)P2的功能受到关注。随着进展,需要更精细准确的PI分布信息。多数研究使用利用PI结合结构域的荧光生物传感器和/或抗PI抗体免疫标记,但两种方法均存在已知局限。本文考察近期...
在静息细胞中,核因子κB(NF-κB)转录因子家族通过与胞质抑制蛋白κBα(IκBα)结合而保持失活状态。肿瘤坏死因子α(TNFα)或细菌脂多糖等胞外刺激通过诱导 IκBα 磷酸化及其泛素-蛋白酶体降解激活 NF-κB。本研究将单体荧光蛋白 Kusabira-Orange 2(mKO2)与 IκBα 融合,构建新型荧光生物传感器 m...
氨基酰-tRNA合成酶复合体相互作用多功能蛋白2(AIMP2)外显子2缺失(DE2)是一种与卵巢癌、肺癌等多种癌症相关的遗传缺失,可作为疾病诊断的癌症指标。本文开发了一种基于目标DNA存在下拆分G-四链体形成并结合链置换的无标记检测方法,用于灵敏、选择性检测AIMP2外显子2缺失。与基因序列分析和毛细管电泳相比,该方法操作简便、成本...
本研究构建了一种高灵敏、高选择性的生化气体传感器(bio-sniffer)及带皮肤气体采集池的实时监测系统,用于测定人体皮肤表面乙醇气体浓度。该传感器以乙醇脱氢酶(ADH)为识别元件,利用乙醇在 ADH 催化下氧化生成乙醛和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的反应,通过 NADH 荧光强度变化定量乙醇。检测系统采用紫外发光二极管...
精神类药物滥用已成为全球公共卫生问题。Quenchbody(Q-body)是一种新型荧光免疫传感器,无需额外试剂或洗涤步骤即可即时检测抗原。本研究构建了用于检测抗抑郁药氟伏沙明(fluvoxamine, FLV)的 Q-body,并确定获得最高荧光强度(FI)的最佳条件。作者制备了 5 种 Q-body,荧光染料分别标记在 scFv...
本文报道了一种基于酶辅助级联放大策略的简单无标记荧光生物传感器,用于超灵敏检测DNA。该放大体系由发夹结构DNA(H-DNA)和外切酶III(EXO III)组成。目标DNA可与H-DNA杂交,启动EXO III辅助的目标循环放大,产生大量富含G的DNA(G-DNA)。G-DNA的一段序列被设计为与目标DNA相同,因此也能与H-DN...
检测与药物作用相关的特异性基因为个体化医疗提供科学指导。本文以慢性乙型肝炎病毒(HBV)治疗相关单核苷酸多态性(SNP)基因分型检测为例,基于超支化滚环扩增(HRCA)构建了一种高灵敏、高选择性荧光生物传感器。单碱基突变DNA(mutDNA)可与特异性设计的鉴别锁式探针完全杂交,并启动HRCA反应;随后释放大量双链DNA序列,加入S...
钠是生物体系中最常见的金属离子之一,但基于DNA的钠探针直到近期才被报道。NaA43是一种仅由Na+激活的Na+特异性RNA切割DNAzyme。本研究以六氨合钴(III)(Co(NH3)63+)作为预期金属辅因子进行体外筛选,却获得NaA43的突变体NaH1,二者仅相差两个核苷酸。NaA43的最适pH为7.0,而NaH1的最适pH为...