A yeast FRET biosensor enlightens cAMP signaling.
出芽酵母中的 cAMP-PKA 信号级联调控细胞对变化环境的适应。作者开发了 yEPAC，一种基于 FRET 的酵母 cAMP 生物传感器，并结合同步流式细胞术，在突然营养转换过程中对单细胞水平的动态 cAMP 变化进行高通量定量。研究发现，特征性 cAMP 峰能够区分不同碳源转换，并在单细胞间较为均一，尤其向葡萄糖转换时最为明显。...
pH Biosensing by PI4P Regulates Cargo Sorting at the TGN.
磷脂酰肌醇、二酰甘油焦磷酸、神经酰胺-1-磷酸和磷脂酸是一类含有磷酸单酯头基的膜信号脂质，其头基pKa位于生理范围。磷脂酸的磷酸单酯头基可随胞内pH改变质子化状态，从而调节效应蛋白结合，使其成为pH生物传感器。本文证明，在酿酒酵母反式高尔基体网络（TGN）中，pleckstrin homology（PH）域与磷脂酰肌醇4-磷酸（PI...
Introducing fluorescence resonance energy transfer-based biosensors for the analysis of cAMP-PKA signalling in the fungal pathogen Candida glabrata.
cAMP-PKA通路在多种生物信号转导中起核心作用，在白色念珠菌等病原真菌中与毒力相关，但光滑念珠菌中该通路的作用仍不清楚。为在活细胞中动态监测cAMP-PKA活性，作者将AKAR3和EPAC2两种FRET生物传感器转入光滑念珠菌BG2，构建由CgPGK1启动子驱动、含hphNT1标记的质粒pLDg03和pLDg04。利用CellA...
Glucose- and hormone-induced cAMP oscillations in α- and β-cells within intact pancreatic islets.
cAMP 是调控胰岛 β 细胞胰岛素和 α 细胞胰高血糖素分泌的关键第二信使。分散 β 细胞可出现 cAMP 振荡，但完整胰岛内信号动力学尚不清楚。本研究利用全内反射显微镜（TIRF）和荧光转位生物传感器，记录完整小鼠胰岛外周 α 和 β 细胞质膜下 cAMP 浓度（[cAMP]pm），并依据肾上腺素的相反作用鉴定细胞类型。结果显示...