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RuBisCO activity assays: a simplified biochemical redox approach for in vitro quantification and an RNA sensor approach for in vivo monitoring.

Microbial cell factories 2024 Faisal M, Sarnaik AP, Kannoju N, Hajinajaf N 等 7 人

核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(RuBisCO)是自然界最丰富的可溶性蛋白,其活性测定对光合作用工程至关重要。现有生化与放射性标记法需添加多种外源组分,成本高且不便。本研究开发两种更简便、低成本且可重复的 RuBisCO 活性检测方法。首先,利用蓝藻细胞裂解液作为 Calvin 循环酶来源,简化 NADH 依赖分光光度法,比较...

Real-time monitoring of the in vivo redox state transition using the ratiometric redox state sensor protein FROG/B.

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2020 Sugiura K, Mihara S, Fu N, Hisabori T

细胞内氧化还原状态是调控多种生理过程的关键因素,实时监测该状态对理解细胞稳态具有重要意义。已有多种荧光传感器蛋白用于监测细胞内氧化还原变化,但作者此前开发的 Oba-Q 和 Re-Q 分别在氧化和还原条件下发生荧光淬灭,其发射强度直接受原位表达水平影响,难以定量。为克服这一局限,本研究设计了一种具有单一激发峰和双可变发射峰的氧化还原...