Engineering protein and DNA tools for creating DNA-dependent protein switches.
可开关蛋白能响应配体结合、pH、温度或光等输入,在失活(OFF)与激活(ON)构象间转换。CRISPR系统中的Cas核酸酶是典型例子,其活性由特定DNA或RNA序列结合调控。虽然Cas酶中寡核苷酸结合调控生物活性的机制复杂且高度特异,但蛋白工程与DNA工程的进展使这种控制模式可引入其他酶。本章重点介绍结合这两类工程手段构建生物传感器...
可开关蛋白能响应配体结合、pH、温度或光等输入,在失活(OFF)与激活(ON)构象间转换。CRISPR系统中的Cas核酸酶是典型例子,其活性由特定DNA或RNA序列结合调控。虽然Cas酶中寡核苷酸结合调控生物活性的机制复杂且高度特异,但蛋白工程与DNA工程的进展使这种控制模式可引入其他酶。本章重点介绍结合这两类工程手段构建生物传感器...
基于变构酶响应目标结合并快速改变酶活性的蛋白传感器是均相检测的潜在工具,但构建时难以获得高信噪比(S/N)。高信噪比对于区分信号与背景至关重要,而不同个体血清样本的背景差异可能很大。本文基于模块化荧光素酶 NanoLuc 设计了一种新型生物传感器 NanoSwitch。该传感器可在 45 min 内直接检测 1 μl 血清中的抗体,...