先前基于氢氘交换（HDX）的分析提示，DnaC 结合 DnaB 会改变 DnaB 氨基末端结构域（NTD）构象，从而削弱该 DNA 解旋酶与引物酶（primase）的相互作用。本研究通过生物传感器实验和酶联免疫吸附试验（ELISA）进一步证实，与单独 DnaB 相比，DnaB-DnaC 复合物与 primase 的结合明显减弱。基于...
近期以泛素受体Rpn10蛋白酶体亚基为亲和配体对小鼠脑制备物进行蛋白组学分析，鉴定出一组可结合Rpn10的蛋白。本研究利用Biacore-3000光学生物传感器，定量考察Rpn10与其中GAPDH、丙酮酸激酶及组蛋白H2A、H2B的相互作用。结果表明，固定在CM5芯片上的Rpn10可与GAPDH和丙酮酸激酶发生定量亲和结合，Kd分别...
钙调蛋白（CaM）的功能依赖于其与钙调蛋白结合蛋白的相互作用，并受Ca2+调控。本研究采用生物物理方法，重点利用表面等离子共振（SPR）生物传感器，辅以微尺度热泳（MST）和紫外荧光光谱，分析CaM与神经颗粒蛋白（Ng）及Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶II的CaM结合区（CaMKII290−309）的动力学。SPR证实Ca2+与CaM...
本文介绍利用光学生物传感器（如表面等离子共振、干涉或波导生物传感器）测定可逆蛋白相互作用的平衡与动力学的基本方法。重点说明如何在较少假设下获得可靠结果，并讨论常见实验伪影的避免。光学生物传感器利用表面限制电磁场实时监测传感表面附近折射率变化；将一种结合组分固定为配体，另一种可溶组分作为分析物，结合使表面质量增加，信号近似正比于表面结...
细胞生化活性具有区室化特征，但目前缺乏可在活细胞中按区室化尺度可视化动态蛋白活性的通用方法。本文提出一类新的荧光生物传感器，可在活细胞中检测生化活性，空间分辨率最高比衍射极限提高三倍。这些 FLINC（接触诱导荧光涨落增强）生物传感器利用结合引起的蛋白荧光动力学变化，将激酶活性或蛋白-蛋白相互作用转化为荧光涨落变化，并可通过随机光学...
本文报道了一种用于微阵列高通量蛋白相互作用分析的无标记检测系统。作者采用单波长成像反射干涉（1λ-iRIf）作为检测技术，并制备显微镜载玻片格式的微流控流池，以降低试剂消耗并兼容常规实验室操作。与成像表面等离子共振、石英晶体微天平或生物层干涉相比，该系统对温度漂移更稳健，且可分析更大阵列。系统空间分辨率为7 µm，时间分辨率≤50 ...