绿色荧光蛋白（GFP）经分子工程改造为稳定且折叠鲁棒的超级折叠GFP（sfGFP），显著推动了生物传感器开发和荧光标记在生物学中的应用。基于sfGFP的自组装双片段split-FP系统被广泛用于在体外监测可溶性蛋白表达，并在细胞内追踪蛋白定位与转运。近年来发展的三片段split-FP系统依赖三个GFP片段的自组装，尤其适合检测蛋白-...
本研究旨在利用12种细胞色素P450（CYP）异构体及其两种氧化还原伙伴——NADPH依赖性细胞色素P450还原酶（CPR）和肾上腺素蛋白（Adx），比较P450依赖性线粒体（mit）与微粒体（mic）单加氧酶系统中蛋白-蛋白相互作用的亲和力和热力学差异。采用Biacore 3000表面等离子共振（SPR）生物传感器测定平衡解离常数...
许多蛋白质可被裂解为若干片段，这些片段在无需共价连接的情况下可自发重组为具有功能的完整蛋白。对于分裂绿色荧光蛋白（split GFPs），片段重组会恢复或形成荧光读出，因此被广泛用于研究蛋白质-蛋白质相互作用。本文综述了分裂GFP方法的适用范围与主要局限，包括片段互补的不可逆性、荧光出现的时间延迟、片段非特异性自组装造成的背景，以及...
骨形态发生蛋白（BMP）与其相应细胞表面受体的结合是启动BMP信号级联反应的关键步骤，因此明确哪些BMP–受体复合物能够形成，对于理解特定BMP的生理功能至关重要。本文介绍了一种基于表面等离子共振（SPR）的高通量方法，用于快速鉴定和评价BMP–受体复合物。该方法将受体的胞外BMP结合域制备为人IgG1-Fc融合蛋白，利用Fc片段将...