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Heme biosensor-guided in vivo pathway optimization and directed evolution for efficient biosynthesis of heme.

Biotechnology for biofuels and bioproducts 2023

血红素在医药和食品领域应用广泛,但其生物合成受多基因表达水平、复杂调控机制和酶活性低等因素限制。本文报道了一种基于血红素响应蛋白 HrtR 的血红素生物传感器引导筛选策略:将 HrtR 的 DNA 结合位点 HrtO 置于四环素外排基因 tcR 上游,使大肠杆菌胞内血红素浓度与四环素抗性/细胞存活建立可定量联系。利用该体系,从随机核...

Tuning the Binding Affinity of Heme-Responsive Biosensor for Precise and Dynamic Pathway Regulation.

iScience 2020 Zhang J, Wang Z, Su T, Sun H 等 7 人

代谢工程中动态通路控制的关键在于人工调控系统组分可调节。本文设计并构建了一种血红素响应调控系统,包含血红素生物传感器 HrtR 和 CRISPR 干扰(CRISPRi),用于在维持胞内血红素稳态的同时调控化学品合成。通过半理性设计和 HrtR 位点饱和突变,获得一系列具有不同灵敏度和阈值的工程化生物传感器;血红素滴定和分子动力学模拟...

A dual component heme biosensor that integrates heme transport and synthesis in bacteria.

Journal of microbiological methods 2015 Nobles CL, Clark JR, Green SI, Maresso AW

细菌病原体通过获取宿主铁维持生长与复制,血红素是血红蛋白结合的含铁辅因子,可被细菌蛋白利用以获取铁。现有胞内血红素检测方法繁琐、依赖复杂化学或放射性,限制了血红素转运与降解机制研究。作者假设血红素稳态可用荧光方法测量,将人源血红素加氧酶1(HO1)催化血红素转化为胆绿素 IXα,与红外荧光蛋白 IFP1.4 结合后产生近红外光偶联,...