Biotechnology for biofuels and bioproducts
2024
Chen S, Yang Z, Zhong Z, Yu S 等 8 人
经典定向进化是改造生物分子功能的有效策略，但传统方法依赖多步分子生物学操作和反复筛选，耗时费力且通量有限。本研究建立了一种具有温度响应诱导可调性的超高通量体内连续定向进化系统。该系统基于工程化热响应阻遏蛋白 cI857 调控错误倾向 DNA 聚合酶 Pol I* 的表达，并结合携带温度敏感缺陷的基因组 MutS 突变体 MutS60...
Biotechnology for biofuels and bioproducts
2023
血红素在医药和食品领域应用广泛，但其生物合成受多基因表达水平、复杂调控机制和酶活性低等因素限制。本文报道了一种基于血红素响应蛋白 HrtR 的血红素生物传感器引导筛选策略：将 HrtR 的 DNA 结合位点 HrtO 置于四环素外排基因 tcR 上游，使大肠杆菌胞内血红素浓度与四环素抗性/细胞存活建立可定量联系。利用该体系，从随机核...
Nature communications
2020
Yao J, He Y, Su N, Bharath SR 等 9 人
羟基酪醇是一种强效抗氧化自由基清除剂，可由酪氨酸生物合成。在代谢工程中，鼠源酪氨酸羟化酶因辅因子依赖和调控复杂而严重限制其产量。本研究在大肠杆菌中构建高效羟基酪醇全细胞催化剂，通过逐步解除两个限速酶步骤提升通路效率。首先，基于结构引导建模与定向进化，将大肠杆菌双组分黄素依赖单加氧酶 HpaBC 改造为高活性微生物酪氨酸羟化酶，替代鼠...