Whole-Cell Biosensors Aid Exploration of Vanillin Transmembrane Transport.
基于转录调控蛋白（TRP）的全细胞生物传感器目前应用广泛。本文证明其在筛选小分子细胞外排泵和内排泵方面具有巨大应用潜力。首先，通过改变 TRP VanR 的配体特异性，构建了香草醛全细胞生物传感器，并以该传感器作为高通量筛选工具，从随机基因组突变库中筛选出香草醛产量提高的菌株。研究发现，AcrA 蛋白失活会导致胞内香草醛浓度显著升高...
Developing a highly efficient hydroxytyrosol whole-cell catalyst by de-bottlenecking rate-limiting steps.
羟基酪醇是一种强效抗氧化自由基清除剂，可由酪氨酸生物合成。在代谢工程中，鼠源酪氨酸羟化酶因辅因子依赖和调控复杂而严重限制其产量。本研究在大肠杆菌中构建高效羟基酪醇全细胞催化剂，通过逐步解除两个限速酶步骤提升通路效率。首先，基于结构引导建模与定向进化，将大肠杆菌双组分黄素依赖单加氧酶 HpaBC 改造为高活性微生物酪氨酸羟化酶，替代鼠...
Biochemical and Biodiversity Insights into Heavy Metal Ion-Responsive Transcription Regulators for Synthetic Biological Heavy Metal Sensors.
为适应环境变化并维持细胞稳态，微生物需调控金属离子浓度；金属是许多酶的辅因子，但必需金属过量及重金属均会造成细胞损伤。金属响应转录调控因子通过调控解毒相关基因表达，在金属摄取、外排、隔离及氧化还原解毒中发挥关键作用。其高灵敏、高选择性的金属感知功能使其成为合成生物学中构建重金属生物传感器的理想生物元件。本综述总结 SmtB/ArsR...
Highly Sensitive and Selective Biosensor for a Disaccharide Based on an AraC-Like Transcriptional Regulator Transduced with Bioluminescence Resonance Energy Transfer.
复杂介质中单个糖的准确定量通常依赖HPLC分离，而乳糖酶处理乳品中痕量乳糖的测定尤为困难，因为需在约140 mM葡萄糖和半乳糖存在下检测痕量乳糖。现有偶联酶生物传感器灵敏度低、生化步骤复杂且耗时。本文提出基于直接分子识别的光子转换策略，筛选出对乳糖高度特异的产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）BgaR转录调...