iScience
2024
Wu X, Xiang R, Yang D, He X 等 9 人
全球新发传染病凸显快速病原诊断需求,拉雅亨尼帕病毒(LayV)作为新发人畜共患病毒缺乏即时检测工具。本研究基于 CRISPR-Cas12a 开发高灵敏 LayV 检测方法。将 Cas12a 与重组酶聚合酶扩增(RPA)联用,在室温 30 min 内实现 10 copies/mL 的 LayV RNA 超灵敏荧光检测;进一步构建辣根过...
Viruses
2023
Wendlandt T, Koch C, Britz B, Liedek A 等 14 人
报道了一种表面展示金黄色葡萄球菌蛋白A(PA)IgG结合域D和E的萝卜脉清病毒(TVCV)颗粒(TVCVPA)的纯化与应用。作者建立了基于反向聚乙二醇(PEG)浓度梯度的选择性再溶解方案,从植物粗沉淀中纯化TVCVPA和野生型TVCV,提高了病毒颗粒完整性。TVCVPA每个病毒可负载超过500个IgG,并用于免疫捕获荧光染料、GFP...
Gels (Basel, Switzerland)
2023
Morosanova MA, Morosanova EI
色原酶反应便于检测多种生物活性化合物,溶胶-凝胶膜是生物传感器开发的有前景平台。本文优化了在聚苯乙烯比色皿内壁制备掺杂辣根过氧化物酶(HRP)、蘑菇酪氨酸酶(MT)和香蕉粗提物(BE)的透明溶胶-凝胶膜条件,提出两种前驱体路线:正硅酸乙酯-苯基三乙氧基硅烷(TEOS-PhTEOS)混合物和硅聚乙二醇(SPG)。两类膜中 HRP、MT...
Applied biochemistry and biotechnology
2023
da Costa FP, Henriques RO, Furigo Junior A
酚是化学工业废水中常见的有毒污染物,即使低浓度也具有强毒性。本研究报道了一种绿色、简便、快速的酚定性生物传感方法,采用辣根过氧化物酶(HRP)与铜离子(Cu2+)或钙离子(Ca2+)通过蛋白-无机自组装制备杂化纳米花(hNF),并将其负载于聚偏氟乙烯(PVDF)膜上。SEM、EDS、FTIR 和 XRD 证实酶被有效包埋于杂化结构中...
Spectrochimica acta. Part A, Molecular and biomolecular spectroscopy
2021
Behrouzifar F, Shahidi SA, Chekin F, Hosseini S 等 5 人
本文报道了一种基于辣根过氧化物酶(HRP)/还原氧化石墨烯(rGO)杂化材料的简单、灵敏比色法,用于检测过氧化氢(H2O2)。rGO 以绿茶提取物作为生物还原剂和稳定剂制备,并负载 HRP;Au 界面经 HRP-rGO 修饰。循环伏安、扫描电子显微镜、能量色散 X 射线光谱和拉曼光谱证实 HRP-rGO 杂化结构形成。HRP-rGO...
Talanta
2021
Zeng R, Wang J, Wang Q, Tang D 等 5 人
本文设计了一种通用比色传感平台,用于癌症来源外泌体(HepG2细胞来源)的灵敏、特异、快速筛查。该平台引入辣根过氧化物酶封装DNA纳米花(HRP-DF)作为生物识别元件和信号产生标签。在滚环扩增(RCA)过程中,HRP同时与不断增长的超长链DNA及焦磷酸镁(Mg2PPi)晶体结合,从而将HRP直接固定于DNA纳米花中。以编码CD63...
Biosensors & bioelectronics
2020
Wu S, Sun Z, Peng Y, Han Y 等 8 人
本研究制备了肽功能化金属有机框架(MOFs)纳米复合标签,用于超灵敏检测分泌性酸性富含半胱氨酸蛋白(SPARC)。首先以咪唑-2-甲醛(2-ICA)和锌盐共沉淀合成 ZIF-90,并在合成过程中封装辣根过氧化物酶(HRP),形成 HRP@ZIF-90 纳米颗粒;ZIF-90 作为保护性载体提高 HRP 稳定性,并提供表面醛基用于后修...
Talanta
2020
Afriat R, Chalupowicz D, Eltzov E
为快速、灵敏地监测牛奶中病原微生物污染并保障公共卫生,作者开发了一种基于硝酸纤维素膜的比色抗体层叠垫(stack pad)生物传感器。该装置是对侧向流免疫分析的改良,由上至下依次包含样品垫、结合垫、六层大肠杆菌DH5α阻断层和含干燥底物的吸收垫;结合垫中预载与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗大肠杆菌抗体。牛奶样品加入后,目标菌与HR...
Analytica chimica acta
2020
Kang J, Yeom G, Jang H, Park CJ 等 5 人
本研究提出一种简单、通用且高灵敏的比色生物传感器,用于检测多种生物标志物。该体系以靶标特异性DNA适配体作为识别元件,并以工程化的链霉亲和素融合复制蛋白A 70 kDa(RPA70A)连接生物素-辣根过氧化物酶(HRP)作为比色信号元件。为提升相对其他比色检测技术的灵敏度与稳定性,作者将新筛选的异质夹心DNA适配体与蛋白质工程相结合...
Preparative biochemistry & biotechnology
2020
Dabhade A, Jayaraman S, Paramasivan B
儿茶酚和间苯二酚等酚类化合物是水体环境中具有毒性和持久性的污染物。色谱法和分光光度法等常规检测方法耗时且需要精密仪器与专业人员。开发一种简单、低成本、便携且可一次性使用的纸基生物传感器可作为传统方法的替代。本研究通过固定辣根过氧化物酶(HRP)构建纸基生物传感器,用于检测水样中的儿茶酚和间苯二酚。HRP 催化酚类化合物氧化为半醌,随...
Chemistry (Weinheim an der Bergstrasse, Germany)
2020
Márquez A, Santiago S, Domínguez C, Muñoz-Berbel X 等 5 人
在比色生物传感器开发中,电致变色介导剂已被广泛使用,但其初始氧化还原态难以恢复,通常需要电化学处理或添加抗氧化剂,使原本简单的传感器结构复杂化,因此多数此类检测仍采用一次性配置。本文首次报道将双酸二噻吩乙烯 1,2-双(5-羧基-2-甲基噻吩-3-基)环戊烯(DTE)光电致变色化合物用作辣根过氧化物酶(HRP)的底物。DTE 开环形...
Nanomaterials (Basel, Switzerland)
2020
Caro N, Bruna T, Guerreiro A, Alvarez-Tejos P 等 9 人
本文提出一种简单直接的微孔板包被方法,利用氟苯尼考(FF)分子印迹聚合物纳米颗粒(FF-nanoMIPs)构建类似酶联免疫吸附测定(ELISA)的检测体系,用于真实食品样品液态牛奶和三文鱼肌肉中FF的定量分析。FF-nanoMIPs采用固相合成法制备,以固定化FF为模板,并通过动态光散射、SPR-2生物传感器系统和透射电子显微镜进行...
Talanta
2019
Zhao M, Li Y, Ma X, Xia M 等 5 人
双酶共固定常因位点竞争而效率较低。本研究采用水稳定金属有机框架 PCN-333(Al) 作为载体,利用其高比表面积和超大孔笼,分别将胆固醇氧化酶(ChOx)吸附于材料表面,并将辣根过氧化物酶(HRP)包埋于介孔笼内,制备 PCN-333/ChOx&HRP 复合酶材料。通过 SEM、XRD、共聚焦显微镜、氮气吸附等温线和热重分析表征,...
The journal of physical chemistry. B
2019
Crosley MS, Yip WT
本文报道了利用动力学掺杂(kinetic doping)技术首次构建多酶、多步反应生物传感器。作者将葡萄糖氧化酶(GOD)与辣根过氧化物酶(HRP)同时负载于二氧化硅溶胶-凝胶薄膜中,形成双酶薄膜。葡萄糖在 GOD 催化下氧化生成过氧化氢,HRP 进一步催化愈创木酚(guaiacol)氧化为有色醌产物,从而通过 436 nm 吸光度...
Carbohydrate polymers
2019
Li W, Zhang L, Li Q, Wang S 等 7 人
本研究开发了一种基于多孔结构纤维素微球的葡萄糖比色生物传感器,实现“信号与颜色”双重输出。首先采用低温等离子诱导接枝聚合技术,将丙烯酸单体接枝到再生纤维素微凝胶表面,引入羧基功能基团;随后通过 EDC-NHS 交联反应将葡萄糖氧化酶(GOx)和辣根过氧化物酶(HRP)共价固定于微球内部,形成多孔酶微球。检测时,GOx 催化葡萄糖氧化...
ACS omega
2018
Crosley MS, Yip WT
本研究将动力学掺杂策略拓展至浸涂法制备二氧化硅溶胶-凝胶薄膜,用于构建高负载酶的光学/比色生物传感器。通过控制溶胶成膜后浸入酶溶液的时间窗口,延缓缩聚反应,使酶在薄膜尚未完全固化前进入多孔网络,从而显著提高负载效率。以辣根过氧化物酶(HRP)和细胞色素 C(CytC)为模型,浸涂薄膜中可及酶浓度分别达到 5.37±0.5 和 10....
Journal of nanoscience and nanotechnology
2018
Chung M, Jang YJ, Kim MI
本文报道了一种用于临床人血样本胆固醇多重检测的微孔板比色方法。该方法采用新型多酶共包埋有机–无机杂化纳米花,将胆固醇氧化酶(ChOx)和辣根过氧化物酶(HRP)作为有机组分,以铜磷酸盐作为无机组分,用于检测血液样本中的胆固醇水平。杂化纳米花通过室温超声 5 分钟的简单快速方法合成,可实现一锅双酶级联反应。纳米花中的 ChOx 仅在样...
Spectrochimica acta. Part A, Molecular and biomolecular spectroscopy
2018
Wang W, Zou Y, Yan J, Liu J 等 7 人
本文报道了一种用于检测人绒毛膜促性腺激素(hCG)的超灵敏比色生物传感器/免疫分析方法。该方法基于辣根过氧化物酶(HRP)与金铂核壳纳米颗粒(Au@Pt NPs)对H2O2-TMB体系的双催化作用,采用自下而上策略构建。将HRP与小鼠单克隆抗hCG β亚基抗体(mAb1)共同固定于Au@Pt NPs表面,形成平均粒径42.8 nm(...
Analytical biochemistry
2017
Ying N, Sun T, Chen Z, Song G 等 9 人
微小RNA(miRNAs)在基因表达调控中发挥关键作用,可作为多种疾病尤其是癌症早期诊断的生物标志物,但其检测仍具挑战性。本文报道了一种辣根过氧化物酶(HRP)辅助杂交链式反应(HCR)比色检测 miR-155 的方法。在目标 miRNA 存在时,固定于微孔板上的捕获探针与目标 miR-155 及报告探针 3'端结合,形成夹心结构;...
Methods in enzymology
2017
Riccardi CM, Kasi RM, Kumar CV
本文报道了一种无需活化纤维素支撑体的简单方法,利用聚丙烯酸(PAA)作为纳米铠甲,将葡萄糖氧化酶(GOx)和辣根过氧化物酶(HRP)互锁固定在纤维素纤维中。所得酶纸廉价、稳定、简单、可穿戴且可洗涤。PAA 作为多功能连接链,将酶缠绕并固定在纸纤维周围,使其免受热/化学变性,并在洗涤剂洗涤时不释放。互锁酶因构象熵降低而更耐变性,经尿素...