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Screening and Cellular Characterization of Genetically Encoded Voltage Indicators Based on Near-Infrared Fluorescent Proteins.

ACS chemical neuroscience 2020 Monakhov MV, Matlashov ME, Colavita M, Song C 等 8 人

作者开发了一类基于细菌光敏色素衍生近红外荧光蛋白的遗传编码电压指示剂。这些新指示剂采用跨膜电压传感域,经 640 nm 光激发,并在 670 nm 检测发射,从而可在近红外组织透明窗口成像。其光谱特性允许与蓝绿光光遗传执行器同时激活,也可与绿色钙指示剂配对实现电压-钙同步成像。经迭代优化得到名为 nirButterfly 的荧光探针...

Near-Infrared Fluorescent Proteins: Multiplexing and Optogenetics across Scales.

Trends in biotechnology 2018 Shcherbakova DM, Stepanenko OV, Turoverov KK, Verkhusha VV

哺乳动物组织对近红外(NIR)光相对透明,因此由细菌光敏色素工程改造得到的NIR荧光蛋白(FPs)已成为非侵入活体成像的常用探针。近年来,这些遗传编码NIR探针在亮度、单体化、光谱特性和生物传感器兼容性方面显著提升,使此前难以实现的成像实验成为可能。本文综述单体NIR荧光蛋白与NIR生物传感器如何与常见绿色荧光蛋白(GFP)探针及蓝...

Direct multiplex imaging and optogenetics of Rho GTPases enabled by near-infrared FRET.

Nature chemical biology 2018 Shcherbakova DM, Cox Cammer N, Huisman TM, Verkhusha VV 等 5 人

由于现有遗传编码探针存在光谱重叠,直接可视化并光控多个细胞过程具有挑战。本文报道迄今最红移的单体近红外(NIR)荧光蛋白 miRFP720,以及全近红外 Förster 共振能量转移(FRET)对 miRFP670–miRFP720,使所设计的生物传感器能够与 CFP–YFP 成像和蓝绿光遗传学工具兼容。作者开发了 Rac1 GTP...

Bright monomeric near-infrared fluorescent proteins as tags and biosensors for multiscale imaging.

Nature communications 2016 Shcherbakova DM, Baloban M, Emelyanov AV, Brenowitz M 等 6 人

单体近红外(NIR)荧光蛋白(FPs)作为蛋白标签和生物传感器组件,在深组织成像与多色显微中需求很高。作者从细菌光敏色素工程化得到三个亮、光谱可区分的单体近红外荧光蛋白,称为 miRFPs,可像 GFP 类荧光蛋白一样使用,仅依赖内源胆绿素。miRFPs 在哺乳动物细胞中比其它单体近红外荧光蛋白亮 2–5 倍,蛋白融合定位良好,支持...