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Iterative screening methodology enables isolation of strains with improved properties for a FACS-based screen and increased L-DOPA production.

Scientific reports 2019

为优化微生物宿主以大规模生产高价值代谢物,常需对宿主基因组进行多轮突变与改造。本文报道了一种基于流式细胞分选(FACS)富集 L-DOPA 酶联生物传感器的三轮筛选策略,用于提高酿酒酵母中 L-DOPA 产量。该方法仅构建一次带条形码的体外转座子介导基因破坏文库,并通过同源重组将同一文库整合到每轮更新后的背景菌株中,从而避免每轮重新...

全细胞生物传感器 L-DOPA荧光筛选FACS酵母代谢工程

Metabolic engineering: Biosensor keeps DOPA on track.

Nature chemical biology 2015 Peralta-Yahya P

本文评论了 DeLoache 等构建的左旋多巴(L-DOPA)比色生物传感器及其在酵母代谢工程中的应用。苯基异喹啉生物碱(BIAs)的微生物合成长期受限于多巴胺水平不足,而酪氨酸羟化酶在酵母中活性低且易将 L-DOPA 过度氧化为多巴醌(dopaquinone)。作者利用 DOPA 双加氧酶将 L-DOPA 转化为黄色色素 beta...